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pLKO.1-puro

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  • Ybscience
  • 中国/美国
  • YB-0874
  • 2025年07月10日
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    • 英文名

      pLKO.1-puro

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      大量

    • 供应商

      钰博生物

    • 规格

      1ug/5ug

    pLKO.1-puro

    pLK0.1-puro载体基本信息

    出品公司: Ybscience
    载体名称: pLKO.1 puro,  pLK0.1 puro
    质粒类型: 慢病毒载体;RNAi载体
    高拷贝/低拷贝: 高拷贝
    启动子: --
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 7032bp
    5' 测序引物及序列: GACTATCATATGCTTACCGT
    3' 测序引物及序列: --
    载体标签: --
    载体抗性: 氨苄青霉素
    筛选标记: 嘌呤霉素
    克隆菌株: Stbl3 , E.coli
    稳定性: 稳表达
    组成型/诱导型: 组成型
    病毒/非病毒: 慢病毒
     

    pLK0.1-puro载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pLKO.1 puro载体图谱


     

    pLK0.1-puro载体简介

     

    pLK0.1-puro载体序列

    下面是pLKO.1-puro载体无插入片段情况下的载体序列。
    
    LOCUS       pLKO.1 puro	7032 bp 	DNA  circular	SYN
    DEFINITION  pLKO.1 puro
    ACCESSION   
    KEYWORDS    
    SOURCE      
      ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..7032
                         /organism="pLKO.1 puro"
                         /mol_type="other DNA"
         CDS             289..1128
                         /label="ORF frame 1"
         CDS             complement(334..1179)
                         /label="ORF frame 1"
         gene            529..1128
                         /label="puro (variant)"
                         /gene="puro (variant)"
         misc_feature    1239..1260
                         /label="U3PPT"
         misc_feature    1239..1254
                         /label="cPPT"
         misc_feature    1256..1308
                         /label="delta_U3"
         misc_feature    1309..1489
                         /label="HIV-1_5_LTR"
         misc_feature    1309..1489
                         /label="truncHIV-1_3_LTR"
         terminator      1564..1683
                         /label="SV40_PA_terminator"
         misc_feature    1652..1671
                         /label="EBV_rev_primer"
         rep_origin      1701..1799
                         /label="SV40_origin"
         misc_feature    1784..1803
                         /label="SV40pro_F_primer"
         promoter        complement(1878..1896)
                         /label="T7_promoter"
         promoter        complement(1906..1922)
                         /label="M13_forward20_primer"
         misc_feature    complement(1915..1937)
                         /label="M13_pUC_fwd_primer"
         misc_feature    1915..2063
                         /label="lacZ_a"
         rep_origin      2081..2387
                         /label="f1_origin"
         promoter        2580..2608
                         /label="AmpR_promoter"
         gene            2650..3510
                         /label="Ampicillin"
                         /gene="Ampicillin"
         CDS             2650..3510
                         /label="ORF frame 1"
         rep_origin      3665..4284
                         /label="pBR322_origin"
         promoter        4593..4622
                         /label="lac_promoter"
         misc_feature    4636..4658
                         /label="M13_pUC_rev_primer"
         promoter        4657..4675
                         /label="M13_reverse_primer"
         promoter        4692..4711
                         /label="T3_promoter"
         misc_feature    4965..5145
                         /label="HIV-1_5_LTR"
         misc_feature    4965..5145
                         /label="truncHIV-1_3_LTR"
         misc_feature    5256..5300
                         /label="HIV-1_psi_pack"
         CDS             5688..6545
                         /label="ORF frame 3"
         misc_feature    5810..6043
                         /label="RRE"
         promoter        6579..6811
                         /label="hU6_promoter"
         misc_feature    6741..6760
                         /label="LKO1_5_primer"
         misc_feature    6867..6882
                         /label="cPPT"
         CDS             complement(6948..530)
                         /label="ORF frame 2"
    
    ORIGIN
        1 ttggggttgc gccttttcca aggcagccct gggtttgcgc agggacgcgg ctgctctggg
       61 cgtggttccg ggaaacgcag cggcgccgac cctgggtctc gcacattctt cacgtccgtt
      121 cgcagcgtca cccggatctt cgccgctacc cttgtgggcc ccccggcgac gcttcctgct
      181 ccgcccctaa gtcgggaagg ttccttgcgg ttcgcggcgt gccggacgtg acaaacggaa
      241 gccgcacgtc tcactagtac cctcgcagac ggacagcgcc agggagcaat ggcagcgcgc
      301 cgaccgcgat gggctgtggc caatagcggc tgctcagcag ggcgcgccga gagcagcggc
      361 cgggaagggg cggtgcggga ggcggggtgt ggggcggtag tgtgggccct gttcctgccc
      421 gcgcggtgtt ccgcattctg caagcctccg gagcgcacgt cggcagtcgg ctccctcgtt
      481 gaccgaatca ccgacctctc tccccagggg gatccaccgg agcttaccat gaccgagtac
      541 aagcccacgg tgcgcctcgc cacccgcgac gacgtcccca gggccgtacg caccctcgcc
      601 gccgcgttcg ccgactaccc cgccacgcgc cacaccgtcg atccggaccg ccacatcgag
      661 cgggtcaccg agctgcaaga actcttcctc acgcgcgtcg ggctcgacat cggcaaggtg
      721 tgggtcgcgg acgacggcgc cgcggtggcg gtctggacca cgccggagag cgtcgaagcg
      781 ggggcggtgt tcgccgagat cggcccgcgc atggccgagt tgagcggttc ccggctggcc
      841 gcgcagcaac agatggaagg cctcctggcg ccgcaccggc ccaaggagcc cgcgtggttc
      901 ctggccaccg tcggcgtctc gcccgaccac cagggcaagg gtctgggcag cgccgtcgtg
      961 ctccccggag tggaggcggc cgagcgcgcc ggggtgcccg ccttcctgga gacctccgcg
     1021 ccccgcaacc tccccttcta cgagcggctc ggcttcaccg tcaccgccga cgtcgaggtg
     1081 cccgaaggac cgcgcacctg gtgcatgacc cgcaagcccg gtgcctgacg cccgccccac
     1141 gacccgcagc gcccgaccga aaggagcgca cgaccccatg catcggtacc tttaagacca
     1201 atgacttaca aggcagctgt agatcttagc cactttttaa aagaaaaggg gggactggaa
     1261 gggctaattc actcccaacg aagacaagat ctgctttttg cttgtactgg gtctctctgg
     1321 ttagaccaga tctgagcctg ggagctctct ggctaactag ggaacccact gcttaagcct
     1381 caataaagct tgccttgagt gcttcaagta gtgtgtgccc gtctgttgtg tgactctggt
     1441 aactagagat ccctcagacc cttttagtca gtgtggaaaa tctctagcag tagtagttca
     1501 tgtcatctta ttattcagta tttataactt gcaaagaaat gaatatcaga gagtgagagg
     1561 aacttgttta ttgcagctta taatggttac aaataaagca atagcatcac aaatttcaca
     1621 aataaagcat ttttttcact gcattctagt tgtggtttgt ccaaactcat caatgtatct
     1681 tatcatgtct ggctctagct atcccgcccc taactccgcc catcccgccc ctaactccgc
     1741 ccagttccgc ccattctccg ccccatggct gactaatttt ttttatttat gcagaggccg
     1801 aggccgcctc ggcctctgag ctattccaga agtagtgagg aggctttttt ggaggcctag
     1861 ggacgtaccc aattcgccct atagtgagtc gtattacgcg cgctcactgg ccgtcgtttt
     1921 acaacgtcgt gactgggaaa accctggcgt tacccaactt aatcgccttg cagcacatcc
     1981 ccctttcgcc agctggcgta atagcgaaga ggcccgcacc gatcgccctt cccaacagtt
     2041 gcgcagcctg aatggcgaat gggacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt
     2101 ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc
     2161 tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg
     2221 gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta
     2281 gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt
     2341 ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat
     2401 ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa
     2461 tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaattta
     2521 ggtggcactt ttcggggaaa tgtgcgcgga acccctattt gtttattttt ctaaatacat
     2581 tcaaatatgt atccgctcat gagacaataa ccctgataaa tgcttcaata atattgaaaa
     2641 aggaagagta tgagtattca acatttccgt gtcgccctta ttcccttttt tgcggcattt
     2701 tgccttcctg tttttgctca cccagaaacg ctggtgaaag taaaagatgc tgaagatcag
     2761 ttgggtgcac gagtgggtta catcgaactg gatctcaaca gcggtaagat ccttgagagt
     2821 tttcgccccg aagaacgttt tccaatgatg agcactttta aagttctgct atgtggcgcg
     2881 gtattatccc gtattgacgc cgggcaagag caactcggtc gccgcataca ctattctcag
     2941 aatgacttgg ttgagtactc accagtcaca gaaaagcatc ttacggatgg catgacagta
     3001 agagaattat gcagtgctgc cataaccatg agtgataaca ctgcggccaa cttacttctg
     3061 acaacgatcg gaggaccgaa ggagctaacc gcttttttgc acaacatggg ggatcatgta
     3121 actcgccttg atcgttggga accggagctg aatgaagcca taccaaacga cgagcgtgac
     3181 accacgatgc ctgtagcaat ggcaacaacg ttgcgcaaac tattaactgg cgaactactt
     3241 actctagctt cccggcaaca attaatagac tggatggagg cggataaagt tgcaggacca
     3301 cttctgcgct cggcccttcc ggctggctgg tttattgctg ataaatctgg agccggtgag
     3361 cgtgggtctc gcggtatcat tgcagcactg gggccagatg gtaagccctc ccgtatcgta
     3421 gttatctaca cgacggggag tcaggcaact atggatgaac gaaatagaca gatcgctgag
     3481 ataggtgcct cactgattaa gcattggtaa ctgtcagacc aagtttactc atatatactt
     3541 tagattgatt taaaacttca tttttaattt aaaaggatct aggtgaagat cctttttgat
     3601 aatctcatga ccaaaatccc ttaacgtgag ttttcgttcc actgagcgtc agaccccgta
     3661 gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct ttttttctgc gcgtaatctg ctgcttgcaa
     3721 acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt tgtttgccgg atcaagagct accaactctt
     3781 tttccgaagg taactggctt cagcagagcg cagataccaa atactgttct tctagtgtag
     3841 ccgtagttag gccaccactt caagaactct gtagcaccgc ctacatacct cgctctgcta
     3901 atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc gataagtcgt gtcttaccgg gttggactca
     3961 agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg tcgggctgaa cggggggttc gtgcacacag
     4021 cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa ctgagatacc tacagcgtga gctatgagaa
     4081 agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg gacaggtatc cggtaagcgg cagggtcgga
     4141 acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg ggaaacgcct ggtatcttta tagtcctgtc
     4201 gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga tttttgtgat gctcgtcagg ggggcggagc
     4261 ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt ttacggttcc tggccttttg ctggcctttt
     4321 gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct gattctgtgg ataaccgtat taccgccttt
     4381 gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga acgaccgagc gcagcgagtc agtgagcgag
     4441 gaagcggaag agcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa
     4501 tgcagctggc acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat
     4561 gtgagttagc tcactcatta ggcaccccag gctttacact ttatgcttcc ggctcgtatg
     4621 ttgtgtggaa ttgtgagcgg ataacaattt cacacaggaa acagctatga ccatgattac
     4681 gccaagcgcg caattaaccc tcactaaagg gaacaaaagc tggagctgca agcttaatgt
     4741 agtcttatgc aatactcttg tagtcttgca acatggtaac gatgagttag caacatgcct
     4801 tacaaggaga gaaaaagcac cgtgcatgcc gattggtgga agtaaggtgg tacgatcgtg
     4861 ccttattagg aaggcaacag acgggtctga catggattgg acgaaccact gaattgccgc
     4921 attgcagaga tattgtattt aagtgcctag ctcgatacat aaacgggtct ctctggttag
     4981 accagatctg agcctgggag ctctctggct aactagggaa cccactgctt aagcctcaat
     5041 aaagcttgcc ttgagtgctt caagtagtgt gtgcccgtct gttgtgtgac tctggtaact
     5101 agagatccct cagacccttt tagtcagtgt ggaaaatctc tagcagtggc gcccgaacag
     5161 ggacttgaaa gcgaaaggga aaccagagga gctctctcga cgcaggactc ggcttgctga
     5221 agcgcgcacg gcaagaggcg aggggcggcg actggtgagt acgccaaaaa ttttgactag
     5281 cggaggctag aaggagagag atgggtgcga gagcgtcagt attaagcggg ggagaattag
     5341 atcgcgatgg gaaaaaattc ggttaaggcc agggggaaag aaaaaatata aattaaaaca
     5401 tatagtatgg gcaagcaggg agctagaacg attcgcagtt aatcctggcc tgttagaaac
     5461 atcagaaggc tgtagacaaa tactgggaca gctacaacca tcccttcaga caggatcaga
     5521 agaacttaga tcattatata atacagtagc aaccctctat tgtgtgcatc aaaggataga
     5581 gataaaagac accaaggaag ctttagacaa gatagaggaa gagcaaaaca aaagtaagac
     5641 caccgcacag caagcggccg ctgatcttca gacctggagg aggagatatg agggacaatt
     5701 ggagaagtga attatataaa tataaagtag taaaaattga accattagga gtagcaccca
     5761 ccaaggcaaa gagaagagtg gtgcagagag aaaaaagagc agtgggaata ggagctttgt
     5821 tccttgggtt cttgggagca gcaggaagca ctatgggcgc agcgtcaatg acgctgacgg
     5881 tacaggccag acaattattg tctggtatag tgcagcagca gaacaatttg ctgagggcta
     5941 ttgaggcgca acagcatctg ttgcaactca cagtctgggg catcaagcag ctccaggcaa
     6001 gaatcctggc tgtggaaaga tacctaaagg atcaacagct cctggggatt tggggttgct
     6061 ctggaaaact catttgcacc actgctgtgc cttggaatgc tagttggagt aataaatctc
     6121 tggaacagat ttggaatcac acgacctgga tggagtggga cagagaaatt aacaattaca
     6181 caagcttaat acactcctta attgaagaat cgcaaaacca gcaagaaaag aatgaacaag
     6241 aattattgga attagataaa tgggcaagtt tgtggaattg gtttaacata acaaattggc
     6301 tgtggtatat aaaattattc ataatgatag taggaggctt ggtaggttta agaatagttt
     6361 ttgctgtact ttctatagtg aatagagtta ggcagggata ttcaccatta tcgtttcaga
     6421 cccacctccc aaccccgagg ggacccgaca ggcccgaagg aatagaagaa gaaggtggag
     6481 agagagacag agacagatcc attcgattag tgaacggatc tcgacggtat cgatcacgag
     6541 actagcctcg agcggccgcc cccttcaccg agggcctatt tcccatgatt ccttcatatt
     6601 tgcatatacg atacaaggct gttagagaga taattggaat taatttgact gtaaacacaa
     6661 agatattagt acaaaatacg tgacgtagaa agtaataatt tcttgggtag tttgcagttt
     6721 taaaattatg ttttaaaatg gactatcata tgcttaccgt aacttgaaag tatttcgatt
     6781 tcttggcttt atatatcttg tggaaaggac gaaacaccgg tgaattctcg acctcgagac
     6841 aaatggcagt attcatccac aattttaaaa gaaaaggggg gattgggggg tacagtgcag
     6901 gggaaagaat agtagacata atagcaacag acatacaaac taaagaatta caaaaacaaa
     6961 ttacaaaaat tcaaaatttt cgggtttatt acagggacag cagagatcca ctttggccgc
     7021 ggctcgaggg gg

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 常用载体元件介绍及病毒载体应用

      子CaMKIIa,星型胶质细胞特异性启动子GfaABC1D,心肌特异性启动子cTNT,肝实质细胞特异性启动子TBG等。(2) 荧光:针对编码蛋白,常规推荐目的基因和荧光蛋白非融合表达,通过荧光观察感染效率。若需要用荧光标记目的基因的位置,如亚细胞定位等实验时可考虑做目的基因和荧光蛋白融合表达。因蛋白均有自己的空间结构,若选择融合表达,两个蛋白可能会相互影响。融合表达常用结构:非融合表达常用结构:(3) 抗性:A 常用原核抗性:Amp,Kan。B 常用真核抗性:Puro,blasticidin(BSD,BSR

    • 慢病毒生产方案

      一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)

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