- ¥800 - 1200
- Ybscience
- 中国/美国
- YB-0799
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
pFastBac-c-His-TEV
- 库存：
大量
- 供应商：
钰博生物
- 规格：
1ug/5ug
载体基本信息
| 出品公司: | Ybscience |
|---|---|
| 载体名称: | pFastBac-c-His-TEV |
| 质粒类型: | 昆虫细胞表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | -- |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | -- |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | -- |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | -- |
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | -- |
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文献和实验strep-tag 对 Strep-Tactin XT的亲和力，大规模纯化 CB2 蛋白；然后通过 WB 检测 MBP-CB2 的表达情况，G 蛋白激活实验检测 CB2 的功能活性。 3、CB2 蛋白的纯化的策略：根据不同构建载体表达的情况及 Strep-Tactin 亲和力的测试，作者通过串联亲和层析对 CB2 蛋白进行纯化，分别使用 C 端 His10 和 N 端 twin-Strep-tag。首先使用 Ni-resin 进行第一步纯化后，再从含有 CB2 蛋白的粗提物进行透析，用 TEV 蛋白
蛋白的损失。 如何进行柱上酶切 柱上酶切纯化路线比较简单，只需上样后加入蛋白酶，在合适的温度下进行孵育一段时间，经过清洗便可得到纯度较高的无标签的目标蛋白。 去除标签的关键在于选择高效的蛋白酶并构建相应的氨基酸识别序列。下表展示的是几种常见的内切酶及对应酶切位点。 组氨酸标签由于分子量小通常不需要去除。如有必要，可使用 TEV 蛋白酶去除组氨酸标签。由于TEV酶带有六组氨酸标签，因此可实现柱上酶切而得到高纯度无标签的目标蛋白。 PreScission
人 1-118 44c a. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。 b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。 c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。 Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器，质膜或者骨架的蛋白，相对于其它标签系统来讲，NusA标签是最好的可溶性表达
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