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- LMAI Bio
- 上海
- LM130827-10
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Small RNA Cloning Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
10 次
小RNA克隆试剂盒产品及特点
克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail，需在低分子RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接头，经RT-PCR后便可以进行克隆。小RNA克隆试剂盒是根据以上原理开发的，其流程图如下：
对低分子RNA进行cDNA扩增的试剂盒，经本试剂盒扩增的cDNA可以用于各种载体的克隆。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆，或者利用接头中带有的酶切位点进行克隆。
小RNA克隆试剂盒备注
使用本试剂盒对小RNA进行克隆时的操作流程见图，详细步骤如下：
1. 将小RNA进行BAP处理，5’端去磷酸化。
2. BAP处理后的小RNA的3’端与生物素化的RNA/DNA接头连接。
3. 用标记Strepto avidin的磁珠，回收带有生物素的RNA/DNA接头的SmallRNA，然后进行5’端磷酸化反应。
4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后，使用RT Primer和M-MLV反转录酶进行反转录反应。
5. 从磁珠上回收合成的cDNA后，进行PCR反应。
6. PCR片段经限制酶酶切后，回收、克隆。
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文献和实验上海##生物技术有限公司开展免费赠送Seamless Cloning kit活动。任何科研用户填写完整以下问卷都有获赠一个单价688元的Seamless Cloning kit的机会。本次活动计划赠送50个Seamless Cloning kit，本次活动赠送的kit为正式产品，非试用装。 Seamless Cloning kit采用与传统方式不同的基因克隆方法，可以将目的基因定点，定向克隆到目的载体，具有简单，快速，高效的特点。可以绕过传统基因克隆技术中没有合适酶切位点等诸多技术难题，顺利
的mirVana离心柱试剂盒来富集小RNA组分。 Q2：你如何有效克隆miRNA? Peng Jin(埃默里大学) 它取决于克隆miRNA的目的。如果是miRNA发现或高通量测序，我们会使用5’和3’接头连接，来产生小RNA库。如果是已知的miRNA，我们想了解它的表达，一般会用PCR扩增包含目的miRNA的DNA片段，然后在适当的载体上验证它的表达。 Winston Kuo(哈佛大学) 在克隆miRNA时，有几个问题。如果你想克隆miRNA周围
。） 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时，可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复，因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子，这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者，Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
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