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- LMAI Bio
- 上海
- LM140409-20
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Zero-background Blunt-end Cloning Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
20次
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）产品及特点
本产品是一种先进的**基因阳性选择克隆系统，可以高效克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。试剂盒提供一个新颖的**基因阳性选择克隆载体克必隆B载体（组成型）。其工作原理如下：
本产品具有下列特点：
1. 采用**基因原理，无需蓝白斑筛选，零背景。
2. 该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。
3. 阳性选择载体和插入片段连接仅需5分钟即可获得超过95%的阳性重组克隆。
4. 由具有校正活性的聚合酶(如：Pfu DNA聚合酶，KOD DNA聚合酶)扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。
5. 连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
6. 为方便酶切作图和插入片段基因操作，本克隆载体的多克隆位点两侧各包含一个BglII识别序列。此外，该载体含有T7启动子，可用于体内或体外转录、插入片段测序等研究。
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）使用及效果
详细使用步骤请参见产品使用手册。
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文献和实验摘 要： RACE是一种快速克隆cDNA末端的方法，目前, 该方法被广泛应用于未知碱基序列基因的克隆，尤其是SMART RACE技术更为人们所青睐。本文总结了我们实验室用SMART RACE技术克隆基因的一些心得体会，希望对用RACE方法克隆基因的同行有些帮助。 关键词： RACE; RNA提取; 兼并引物 中图分类号 :Ｑ75 文献标识码 :Ａ Some Suggestions on Gene Cloning by RACE-PCR Abstacts：RACE
很多新手在问做原核表达需要考虑的载体和菌株的选择，现系统地解答一下，供新手借鉴。
克隆试剂盒 方便地将 PCR 扩增 DNA 直接克隆到 pETBlue 载体中 除了含有未切割质粒的 pETBlue TM 系统， Novagen 还提供可立即插入 PCR 产物的 pETBlue 载体。已有两种试剂盒： AccepTor TM 载体试剂盒能够插入带单个 3' -dA 突出的 DNA ，如非校对 DNA 聚合酶 ( 如 Taq DNA 聚合酶 ) 的扩增产物；而 perfectly Blunt a 克隆试剂盒设计用于克隆任何末端形式的插入片段。 在 pETBlue
水平调控。 以甲醇为碳源时，生长细胞中约5％mRNA来自于A0X1基因。A0X1基因的调控是两步过程：抑制机制加上诱导机制。即在以葡萄糖或甘油为碳源的培养基上生长时抑制转 录；而在以甲醇为唯一生长碳源时，诱导基因转录，蛋白表达。最近在P．Pasotris中克隆到一个组成型启动子：PGAP(三磷酸甘油醛脱氢酶启动子)，在它控制下的p.Lacz基因表达 率比甲醇诱导下的以PAOX1为启动子的产量更高。由于该组成型启动子不需甲醇诱导，发酵工艺更为简单，产量高，所以它是一个很有潜力的启动子。 2、选择标记 选择
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