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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输,-80℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
EHA105 Competent Cell
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
10×100μL
EHA105 农杆菌感受态细胞产品及特点
本产品为EHA105 农杆菌化学感受态细胞, 其具有利福平抗性, 适用于水稻、烟草等植物的转基因操作, 经pCAMBIA2301 质粒检测转化效率高达103cfu/μg。
EHA105 农杆菌感受态细胞干冰运输,-80℃保存,有效期一年。
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文献和实验一.农杆菌感受态细胞的制备 (同大肠杆菌质粒DNA的提取),然后将其转化大肠杆菌,再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM(0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0)液体培养基中,220rpm,28℃振荡培养18 hr
双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置
双元载体的农杆菌转化 1.1农杆菌感受态细胞的制备 1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。 1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。 1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600 =0.5。 1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。
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