pRL-TK

pRL-TK

载体基本信息

出品公司:	Ybscience
载体名称:	pRL-TK
质粒类型:	哺乳细胞表达；启动子增强子报告系统
高拷贝/低拷贝:	--
启动子:	HSV TK
克隆方法:	多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:	4045bp
5' 测序引物及序列:	--
3' 测序引物及序列:	--
载体标签:	--
载体抗性:	氨苄青霉素(Ampicillin)
筛选标记:	--
备注:	pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体，含有SV40增强子。
稳定性:	瞬表达
组成型:	组成型
病毒/非病毒:	非病毒

 

载体质粒图谱和多克隆位点信息

载体简介

pRL 家族是野生型海肾萤光素酶(Rluc) 报告基因对照载体。pRL 载体提供组成型表达的海肾萤光素酶，可与一个萤火虫萤 光素酶载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾萤光素酶的表达为实验的萤火虫萤光素酶报告基因正态化提供内对照值。pRL 载 体包含一个编码海肾萤光素酶(Rluc) 的cDNA, 这个cDNA 从珊瑚虫类腔肠动物海肾(Renilla reniformis) 中克隆而来。目前 有四个不同的启动子构造。其中HSV- 胸腺嘧啶核苷激酶启动子(pRL-TK) 相对较弱， 更适用于海肾萤光素酶报告基因载体 的中性组成型表达。早期SV40 增强子/ 启动子区域(pRL-SV40) 和CMV 极早期增强子/ 启动子区域(pRL-CMV)一般提供高 水平转录，因此可能不适于作为实验载体带有强调控元件的共报告基因。一般我们建议在将要应用的目标细胞中验证某一 个特定共报告基因的性能。除了经过修饰的Rluc 报告基因外，所有pRL载体均是从dam–/dcm– E. coli K 宿主菌株分离而 来，这样可以使用对dam 或 dcm 甲基化敏感的限制性内切酶进行消化。

载体序列

LOCUS       pRL-TK	4045 bp 	DNA	SYN
DEFINITION  pRL-TK
ACCESSION   
KEYWORDS    
SOURCE      
  ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4045
                     /organism="pRL-TK"
                     /mol_type="other DNA"
     CDS             332..796
                     /label="ORF frame 2"
     promoter        complement(532..680)
                     /label="TATA_promoter"
     promoter        543..758
                     /label="TK_promoter"
     misc_feature    829..961
                     /label="chim_int"
     promoter        1006..1024
                     /label="T7_promoter"
     CDS             1034..1969
                     /label="ORF frame 2"
     terminator      complement(1997..2116)
                     /label="SV40_PA_terminator"
     misc_feature    complement(2011..2030)
                     /label="EBV_rev_primer"
     promoter        2289..2317
                     /label="AmpR_promoter"
     gene            2359..3219
                     /label="Ampicillin"
                     /gene="Ampicillin"
     CDS             2359..3219
                     /label="ORF frame 1"
     rep_origin      3374..3993
                     /label="pBR322_origin"
ORIGIN
    1 AGATCTAAAT GAGTCTTCGG ACCTCGCGGG GGCCGCTTAA GCGGTGGTTA GGGTTTGTCT
   61 GACGCGGGGG GAGGGGGAAG GAACGAAACA CTCTCATTCG GAGGCGGCTC GGGGTTTGGT
  121 CTTGGTGGCC ACGGGCACGC AGAAGAGCGC CGCGATCCTC TTAAGCACCC CCCCGCCCTC
  181 CGTGGAGGCG GGGGTTTGGT CGGCGGGTGG TAACTGGCGG GCCGCTGACT CGGGCGGGTC
  241 GCGCGCCCCA GAGTGTGACC TTTTCGGTCT GCTCGCAGAC CCCCGGGCGG CGCCGCCGCG
  301 GCGGCGACGG GCTCGCTGGG TCCTAGGCTC CATGGGGACC GTATACGTGG ACAGGCTCTG
  361 GAGCATCCGC ACGACTGCGG TGATATTACC GGAGACCTTC TGCGGGACGA GCCGGGTCAC
  421 GCGGCTGACG CGGAGCGTCC GTTGGGCGAC AAACACCAGG ACGGGGCACA GGTACACTAT
  481 CTTGTCACCC GGAGGCGCGA GGGACTGCAG GAGCTTCAGG GAGTGGCGCA GCTGCTTCAT
  541 CCCCGTGGCC CGTTGCTCGC GTTTGCTGGC GGTGTCCCCG GAAGAAATAT ATTTGCATGT
  601 CTTTAGTTCT ATGATGACAC AAACCCCGCC CAGCGTCTTG TCATTGGCGA ATTCGAACAC
  661 GCAGATGCAG TCGGGGCGGC GCGGTCCCAG GTCCACTTCG CATATTAAGG TGACGCGTGT
  721 GGCCTCGAAC ACCGAGCGAC CCTGCAGCGA CCCGCTTAAA AGCTTGATTC TTCTGACACA
  781 ACAGTCTCGA ACTTAAGCTG CAGAAGTTGG TCGTGAGGCA CTGGGCAGGT AAGTATCAAG
  841 GTTACAAGAC AGGTTTAAGG AGACCAATAG AAACTGGGCT TGTCGAGACA GAGAAGACTC
  901 TTGCGTTTCT GATAGGCACC TATTGGTCTT ACTGACATCC ACTTTGCCTT TCTCTCCACA
  961 GGTGTCCACT CCCAGTTCAA TTACAGCTCT TAAGGCTAGA GTACTTAATA CGACTCACTA
 1021 TAGGCTAGCC ACCATGACTT CGAAAGTTTA TGATCCAGAA CAAAGGAAAC GGATGATAAC
 1081 TGGTCCGCAG TGGTGGGCCA GATGTAAACA AATGAATGTT CTTGATTCAT TTATTAATTA
 1141 TTATGATTCA GAAAAACATG CAGAAAATGC TGTTATTTTT TTACATGGTA ACGCGGCCTC
 1201 TTCTTATTTA TGGCGACATG TTGTGCCACA TATTGAGCCA GTAGCGCGGT GTATTATACC
 1261 AGACCTTATT GGTATGGGCA AATCAGGCAA ATCTGGTAAT GGTTCTTATA GGTTACTTGA
 1321 TCATTACAAA TATCTTACTG CATGGTTTGA ACTTCTTAAT TTACCAAAGA AGATCATTTT
 1381 TGTCGGCCAT GATTGGGGTG CTTGTTTGGC ATTTCATTAT AGCTATGAGC ATCAAGATAA
 1441 GATCAAAGCA ATAGTTCACG CTGAAAGTGT AGTAGATGTG ATTGAATCAT GGGATGAATG
 1501 GCCTGATATT GAAGAAGATA TTGCGTTGAT CAAATCTGAA GAAGGAGAAA AAATGGTTTT
 1561 GGAGAATAAC TTCTTCGTGG AAACCATGTT GCCATCAAAA ATCATGAGAA AGTTAGAACC
 1621 AGAAGAATTT GCAGCATATC TTGAACCATT CAAAGAGAAA GGTGAAGTTC GTCGTCCAAC
 1681 ATTATCATGG CCTCGTGAAA TCCCGTTAGT AAAAGGTGGT AAACCTGACG TTGTACAAAT
 1741 TGTTAGGAAT TATAATGCTT ATCTACGTGC AAGTGATGAT TTACCAAAAA TGTTTATTGA
 1801 ATCGGACCCA GGATTCTTTT CCAATGCTAT TGTTGAAGGT GCCAAGAAGT TTCCTAATAC
 1861 TGAATTTGTC AAAGTAAAAG GTCTTCATTT TTCGCAAGAA GATGCACCTG ATGAAATGGG
 1921 AAAATATATC AAATCGTTCG TTGAGCGAGT TCTCAAAAAT GAACAATAAT TCTAGAGCGG
 1981 CCGCTTCGAG CAGACATGAT AAGATACATT GATGAGTTTG GACAAACCAC AACTAGAATG
 2041 CAGTGAAAAA AATGCTTTAT TTGTGAAATT TGTGATGCTA TTGCTTTATT TGTAACCATT
 2101 ATAAGCTGCA ATAAACAAGT TAACAACAAC AATTGCATTC ATTTTATGTT TCAGGTTCAG
 2161 GGGGAGGTGT GGGAGGTTTT TTAAAGCAAG TAAAACCTCT ACAAATGTGG TAAAATCGAT
 2221 AAGGATCCAG GTGGCACTTT TCGGGGAAAT GTGCGCGGAA CCCCTATTTG TTTATTTTTC
 2281 TAAATACATT CAAATATGTA TCCGCTCATG AGACAATAAC CCTGATAAAT GCTTCAATAA
 2341 TATTGAAAAA GGAAGAGTAT GAGTATTCAA CATTTCCGTG TCGCCCTTAT TCCCTTTTTT
 2401 GCGGCATTTT GCCTTCCTGT TTTTGCTCAC CCAGAAACGC TGGTGAAAGT AAAAGATGCT
 2461 GAAGATCAGT TGGGTGCACG AGTGGGTTAC ATCGAACTGG ATCTCAACAG CGGTAAGATC
 2521 CTTGAGAGTT TTCGCCCCGA AGAACGTTTT CCAATGATGA GCACTTTTAA AGTTCTGCTA
 2581 TGTGGCGCGG TATTATCCCG TATTGACGCC GGGCAAGAGC AACTCGGTCG CCGCATACAC
 2641 TATTCTCAGA ATGACTTGGT TGAGTACTCA CCAGTCACAG AAAAGCATCT TACGGATGGC
 2701 ATGACAGTAA GAGAATTATG CAGTGCTGCC ATAACCATGA GTGATAACAC TGCGGCCAAC
 2761 TTACTTCTGA CAACGATCGG AGGACCGAAG GAGCTAACCG CTTTTTTGCA CAACATGGGG
 2821 GATCATGTAA CTCGCCTTGA TCGTTGGGAA CCGGAGCTGA ATGAAGCCAT ACCAAACGAC
 2881 GAGCGTGACA CCACGATGCC TGTAGCAATG GCAACAACGT TGCGCAAACT ATTAACTGGC
 2941 GAACTACTTA CTCTAGCTTC CCGGCAACAA TTAATAGACT GGATGGAGGC GGATAAAGTT
 3001 GCAGGACCAC TTCTGCGCTC GGCCCTTCCG GCTGGCTGGT TTATTGCTGA TAAATCTGGA
 3061 GCCGGTGAGC GTGGGTCTCG CGGTATCATT GCAGCACTGG GGCCAGATGG TAAGCCCTCC
 3121 CGTATCGTAG TTATCTACAC GACGGGGAGT CAGGCAACTA TGGATGAACG AAATAGACAG
 3181 ATCGCTGAGA TAGGTGCCTC ACTGATTAAG CATTGGTAAC TGTCAGACCA AGTTTACTCA
 3241 TATATACTTT AGATTGATTT AAAACTTCAT TTTTAATTTA AAAGGATCTA GGTGAAGATC
 3301 CTTTTTGATA ATCTCATGAC CAAAATCCCT TAACGTGAGT TTTCGTTCCA CTGAGCGTCA
 3361 GACCCCGTAG AAAAGATCAA AGGATCTTCT TGAGATCCTT TTTTTCTGCG CGTAATCTGC
 3421 TGCTTGCAAA CAAAAAAACC ACCGCTACCA GCGGTGGTTT GTTTGCCGGA TCAAGAGCTA
 3481 CCAACTCTTT TTCCGAAGGT AACTGGCTTC AGCAGAGCGC AGATACCAAA TACTGTTCTT
 3541 CTAGTGTAGC CGTAGTTAGG CCACCACTTC AAGAACTCTG TAGCACCGCC TACATACCTC
 3601 GCTCTGCTAA TCCTGTTACC AGTGGCTGCT GCCAGTGGCG ATAAGTCGTG TCTTACCGGG
 3661 TTGGACTCAA GACGATAGTT ACCGGATAAG GCGCAGCGGT CGGGCTGAAC GGGGGGTTCG
 3721 TGCACACAGC CCAGCTTGGA GCGAACGACC TACACCGAAC TGAGATACCT ACAGCGTGAG
 3781 CTATGAGAAA GCGCCACGCT TCCCGAAGGG AGAAAGGCGG ACAGGTATCC GGTAAGCGGC
 3841 AGGGTCGGAA CAGGAGAGCG CACGAGGGAG CTTCCAGGGG GAAACGCCTG GTATCTTTAT
 3901 AGTCCTGTCG GGTTTCGCCA CCTCTGACTT GAGCGTCGAT TTTTGTGATG CTCGTCAGGG
 3961 GGGCGGAGCC TATGGAAAAA CGCCAGCAAC GCGGCCTTTT TACGGTTCCT GGCCTTTTGC
 4021 TGGCCTTTTG CTCACATGGC TCGAC