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pEE6.4
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钰博生物
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Lonza生物公司的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表达系统载体pEE6.4载体,利用谷氨酰胺合成酶筛选标记,能够高水平的在哺乳细胞内表达目的基因。GS酶是生物体内以谷氨酸和氨为底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能够被甲硫氨酸砜亚胺(methionine sulphoximine,MSX)选择性的抑制。一些哺乳动物细胞,例如小鼠骨髓瘤细胞(NSO细胞系)无法表达GS,所以在不添加谷氨酰胺的情况下, 细胞将无法生长。对于这些细胞系,在无谷氨酰胺的培养基内,一个转染的GS基因可以作为一个筛选标记。其他的一些细胞系,例如CHO-KI,能够产生内源 性的GS酶。对于这些细胞,在无谷氨酰胺培养基内,在高水平足够抑制GS酶合成的MSX(甲硫氨酸砜亚胺)的作用下,可以对细胞的生长提供一个选择压力。1992年,Bebbington等首次报道了使用GS基因细胞系统表达重组的抗体。该载体能够被用来构建快速,高产量,稳定的单克隆抗体表达细胞系。
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