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- 天根
- 中国
- KR123
- 2025年11月07日
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充足
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天根生化科技（北京）
- 规格：
50 μl×50 次
本试剂盒采用一步法使RT和PCR在同一反应体系中进行,反应过程中不需要添加试剂，无需打开管盖，避免了样品间交叉污染的同时也提高了检测的灵敏度。
本试剂盒中的25×RT-PCR Enzyme Mix为TIANGEN新型逆转录酶(King RTase)、抗体修饰的热启动Taq DNA聚合酶和RNase Inhibitor的预混Mix形式，其中的King RTase是分子改造后的新型逆转录酶，特别增加了疏水motif，具有更强的RNA亲和性和热稳定性，提高了该酶的逆转录效率和对具有复杂二级结构RNA模板的延伸能力；PCR过程中采用了性能优良的抗体修饰Taq DNA聚合酶，其中高亲和力抗体可以保证在常温条件下完全封闭Taq酶活性，使得逆转录后的PCR反应具更高的扩增效率和特异性。另外，本产品中的2×FastKing One Step RT-PCR MasterMix为专门为上述两种关键酶而优化的新型反应体系，其中包含必要离子组分、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂，可保证King RTase和Taq聚合酶在整个一步法反应过程中发挥最大功效。
产品特点
反应灵敏高效：性能优良的逆转录酶和Taq酶保证了极高的反应效率；
操作简单快速：双组分的产品形式使得操作过程变得简单快速；
解决复杂模板：通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板；
样品普适性好：对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高。
需自备的试剂
1. 特异性PCR引物；
2. RNA模板。
适用范围
RT-PCR技术可用于检测细胞和组织中的基因表达水平，克隆特定基因的cDNA序列和检测RNA病毒。
储存条件
该试剂盒请置于-20℃保存。-20℃下保质期一年。
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文献和实验请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分？
各位老师： 您们好！偶欲做几个基因的RT-PCR实验。偶先用传统的半定量两步法RT-PCR试剂盒(TaKaRa DRR019A)扩增了几个基因，并用该试剂盒反转录了不少cDNA。但还有2个基因偶打算用real time PCR法来扩增。拟采用TaKaRa DRR041S试剂盒。但是TaKaRa DRR041S试剂盒说明书上写的反转录步骤是使用另外一个单独的RT Reagents (TaKaRa DRR033A)，得到cDNA再用TaKaRa DRR041S试剂盒扩增。但是仅一个RT
1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法，主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物（GSP）起始。 在实际应用中，RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步法
中，逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA，然后通过 PCR 反应扩增 cDNA，为下游实验提供研究模板，因而逆转录酶是实验成功的关键步骤之一（如下图）。选定的逆转录酶应对所有样本均具有最高效率，即便是难转录 RNA 样本，如降解、抑制剂残留或具有高度二级结构的 RNA 样本。 图. 逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）。RT =逆转录，RTase =逆转录酶 常用的 RT-PCR 方法分为一步法和两步法，每种方法都各有优缺点，简要概述如下： 表. 对比一步法和两步法 RT-PCR 定量 RT-PCR
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