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文献和实验一次做对!Erastin诱导HepG2细胞铁死亡实验的黄金操作手册请收好!
10 mmol/L Erastin 铁死亡诱导剂(System Xc⁻抑制剂) Lip-1 铁死亡抑制剂 脂质过氧化物(LPO)荧光法测试盒 检测脂质过氧化水平 谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)比色法测试盒 检测GPX4酶活性 胱氨酸摄取荧光法测试盒 检测胱氨酸摄取能力 增强型细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 检测细胞活力变化 Erastin诱导HepG2细胞 铁死亡模型
呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量。 竞争法 ELISA 不易用自视判断结果,因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异,一般均用比色计测定,读出 S、P和 N 的吸光值。计算方法主要也有两种,即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同,但在计算公式中引入阳性对照 A 值,现举某种检测抗 HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗 HBc 的复钙人血浆,阳性对照中抗HBc含量为 125±1 00u/ml。每次试验设
(NO) 由一氧化氮合酶 (NOS) 的三种亚型产生,它是一种化学信使,与游离半胱氨酸残基反应形成 S-硝基硫醇 (SNOs)。Snitrosylation 是细胞用来稳定蛋白质、调节基因表达和提供 NO 供体的关键 PTM,SNOs 的生成、定位、激活和分解代谢受到严格调控。S-亚硝基化是一种可逆反应,SNOs 在细胞质中的半衰期较短,因为宿主的还原性酶,包括谷胱甘肽 (GSH) 和硫氧还蛋白 (thioredoxin),即脱硝酰基蛋白。因此,SNO 通常储存在膜、囊泡、组织间隙和亲脂性蛋白褶皱中,以保护其不脱
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