组织醛糖还原酶（aldose reductase；AR）活性

醛糖还原酶测定

问：有关测定醛糖还原酶活性时的反应体系有以下几个疑问：1、67mmol/l钠钾磷酸盐缓冲液如何配置？也有人 用50mmol/l的磷酸钾缓冲液二者哪一种更好。2、整个反映体系配置须注意哪些问题？最后加DL-甘油醛还是NADPH。3、NADPH标准曲线绘制分别用多大浓度？请各位指教，谢谢。答：在测定酶的活性时，有时由于酶的纯化不足，导致影响结果，在检测醛糖还原酶活性时要注意以下几点：（一）其它酶和物质的干扰如组织匀浆中往往含有NADH-细胞色素C还原酶，它将干扰各种还原酶的测定。临床酶测定中最典型

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；在细胞发生凋亡阶段，Caspase被激活，活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后，黄色

晶状体醛糖还原酶测定方法的具体步骤

，经37℃保温60分钟后在367／455M条件下测定相对荧光强度，再从事先绘制的NADPH荧光测定工作曲线上读出NADPH含量。l单位(U)酶活性表示一分钟内1ummlo NADPH被氧化的酶量，每份标本的AR活性用U／gHb表示。ELISA法：血约1m1置肝家防凝管，10叨8离心15分钟，吸去血清后红细跑用3倍体积的磷酸盐／氯化钠溶液(100mmol／L磷酸钾／145mm0l/l氯化钠，v／v＝9：1)冲洗三次，加等体积10mmol/l的磷酸缓冲液(ph 7.0)在15000g离心15分钟，弃去沉淀