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文献和实验Cell:诺奖得主新作!在大量病毒中发现微型 CRISPR 系统,可高效编辑人类和植物基因组
,它们也是新的、超紧凑的 CRISPR-Cas 系统的重要来源。 Casλ 处理 crRNA 并切割 dsDNA。来源:Cell 在该研究中,他们特别关注了一种称为 Casλ 的小型 Cas 酶,并发现 Casλ 酶能够诱导人类、拟南芥和六倍体小麦细胞的基因组编辑。 研究人员比较了使用 Casλ 和 Cas12a 核糖核蛋白诱导人和植物细胞内源基因的基因组编辑插入和缺失的效率。尽管尺寸微小,Casλ RNPs 在人类基因组中的编辑效率依然是高效的,有一例甚至超过了 Cas12a 插入缺失
稳定细胞株构建的第一个步骤就是细胞转染,这项实验的原理大家都清楚,但是为什么一上手就会出现多种问题,在实验第一步就栽了跟头呢? 是细胞转染方法不对头?还是实验过程中的某个因素影响了转染效率?了解本文这11个注意事项,让你的细胞转染实验顺利通关! 所谓转染,是指在真核细胞里导入具有生物功能的核酸并核酸的生物功能。通常选用的转染方法包括物理介导法(如电穿孔法、显微注射和基因枪等)、化学介导法(如磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、多种阳离子物质介导法)、生物介导法(如原生质体转染、病毒介导转染
(可使用我公司转染试剂 Polyfect-V 或您的实验室中现有转染试剂)。 5、病毒包装细胞:我公司的 293V、HEK293 或者 HEK293T 均可使用。需要注意的是包装细胞状态对于病毒产量很重要。细胞聚团、贴壁不牢、生长缓慢等均是细胞老化的表现,这样的 293 细胞是不能使用的。 6、慢病毒纯化试剂盒(可用我们的 PEG 纯化产品,货号 P1201;或者其他公司的商品化试剂盒;推荐用超速离心纯化)。 7、Polybrene 慢病毒感染辅助试剂(6 mg/ml
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