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- GMS12208
- 美国
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
杰美基因
- 规格：
5微克
供应试剂主要类别：细胞技术、分子技术、蛋白化学、免疫抗体、医学技术、生物化学、模式生物、微生物、植物、载体、毒理、营养、平台等等相关技术的各种大量试剂。
其中模式生物技术相关试剂类别如下：
线虫试剂专题
果蝇试剂专题
细菌试剂专题
感受态细菌试剂专题
真菌/酵母细胞试剂专题
噬菌体试剂专题
腺病毒试剂专题
质粒抽提试剂专题
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文献和实验的腺病毒DNA与穿梭载体在HEK 293细胞中进行同源重组；更为流行的方法采用了穿梭载体与腺病毒质粒转化一种特殊的菌株(BJ 5183)。然后从细菌中收集重组腺病毒，用其感染HEK 293细胞。虽然这些方法是可行的，但由于在HEK 293细胞中同源重组率偏低；或在转化BJ 5183之前克隆步骤过于复杂，使这两种方法效率偏低(下表)。 同源重组 体外连接法 Viral DNA Plasmid-based 制备穿梭载体和腺病毒载体 7-14天 7-14天 2-3天 目的基因从穿梭载体
和于宿主基因组内，长时间、稳定表达外源基因感染分裂和不分裂细胞只感染有丝分裂细胞高水平表达中水平表达双载体单载体病毒滴度高达1012 pfu/ml病毒滴度最高可达106 pfu/ml可插入高达8kb的外源片段可插入不超过6.5kb的外源片段会引起体内免疫反应不会引起体内免疫反应构建重组腺病毒简单快捷构建重组腺病毒的两种传统方法是以同源重组为基础的。其一是用修饰的腺病毒DNA与穿梭载体在HEK 293细胞中进行同源重组；更为流行的方法采用了穿梭载体与腺病毒质粒转化一种特殊的菌株(BJ 5183
DNA为骨架的复制缺陷型重组腺病毒系统，通过对比其他系统（包括Adeasy、Adeno-X、AdMax等系统），对穿梭载体，病毒骨架载体和包装细胞系都做了改进，并做了大量的实验和重复验证工作后，使得该系统比上述系统有了更强大的优势，可提供高品质、高产量的重组腺病毒。并且在克隆、包装、扩增、纯化、滴度测定等各步条件也做了改进和优化，达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上，还拓展了更广泛的应用，可以提供各种带报告基因的（如GFP、RFP、Luciferase、LacZ
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