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- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
常温运输和保存,有效期一年。
- 英文名:
Virus Precipitation Reagent
- 库存:
大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
100 mL/盒
Virus Precipitation Reagent
产品及特点
生物医学实验中,常常需要从液体样品(如血浆,培养基)中纯化病毒,但由于病毒颗粒十分细小,传统的分离方法是使用长时间超速离心才能将其从液体样品中分离出
来,此操作非常繁琐,并且病毒在此过程中容易变性。为了克服传统方法的缺点,本公司开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能浓缩病毒 100 倍以上,适合各种病毒。
2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和,回收率更高,并且大部分病毒能保持活性,适合各种后续实验,包括转染实验和核酸纯化。
3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单,不需要大型离心机等设备。
4. 适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品 100mL 可以处理 400mL 含病毒的溶液,可以将病毒浓缩 100 倍以上。
5. 已 经 成 功 用 于 coronaviruses 、 rhabdoviruses 、 parainfluenzaviruses 、respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses 等病毒。
6. 对环境水样,请不要使用本产品,而是使用水体病毒沉淀剂。
病毒沉淀剂规格及成分
成 份 编 号 100 mL 包装
本产品 100 mL
使用手册 1 份
运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂 PBS 缓冲液或 TES 缓冲液(用于重悬病毒)
病毒沉淀剂使用方法
注意:需要尽量减少含病毒溶液中蛋白的浓度。收集培养细胞分泌的病毒前,最好换上不含血清蛋白和其他蛋白成分的培养基。
1. 将培养细胞刮下,和培养基一起全部转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心20 分钟。转移上清(含病毒)到新离心管中。如果培养细胞内还有病毒颗粒,并且
病毒颗粒可以抵抗冻融,则可以把细胞冻融数次,释放出包浆的病毒,然后再转移到干净的离心管中,10000rpm 4℃离心 20 分钟。转移上清(含病毒)到新离心管
中。如果病毒溶液不含细胞成分,则直接进入下一步。
2. 在含病毒的上清中加入 1/4 总体积的本产品(4 mL 病毒溶液则加 1 mL 本产品),4℃冰箱中放置过夜或 12 小时以上。病毒在此期间将形成沉淀。
3. 10000rpm 4℃离心 20 分钟收集病毒沉淀,尽可能弃掉所有上清(可以暂时保留上清,等确认病毒浓缩成功后再丢弃)。
4. 将离心管放回离心机短暂离心数秒,再次小心去除残留上清。
5. 将沉淀(病毒颗粒)溶于适量预冷的自备的缓冲液(如 PBS 缓冲液、TES 缓冲液和培养基中,取决于后续实验),立即使用或者-20℃长期保存。
病毒沉淀剂关联产品 一管式病毒 DNAout,水体病毒沉淀剂
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文献和实验1.试材:核酸样品DNA 或RNA。2. 主要仪器(1)分析天平(2)紫外分光光度计(3)冰浴或冰箱(4)离心机(5)离心管(10mL)(6)烧杯(10mL)(7)容量瓶(50mL、100mL)(8)移液管(0.5ml、2mL 和5mL)(9)药品勺和玻璃棒(10)试管和试管架。3.试剂 (1)5%~6%氨水:用25%~30%氨水稀释5 倍。 (2)钼酸铵-过氯酸试剂:取3.6mL70%过氯酸和0.25g 钼酸铵溶于96.4mL 蒸馏水中。 四、操作步骤 1.核酸样品纯度的测定 (1)准确
4冻干品用缓冲液稀释成约10000 cpm·100-1 ·u1-1。 (4) T4抗血清应用液 将T4抗血清(即抗体)冻干品按药盒要求的滴度稀释,放4℃冰箱备用。 (5) 免疫沉淀剂 用分子量6000的聚乙二醇(PEG)60 g溶解于缓冲溶液中,使体积为200 m1即30% PEG溶液,放4 ℃冰箱备用。 [ 仪器 与器械] γ-计数仪、微量加样器及塑料吸头(50 ?l,100 ?l
汇合度达到 70~80%。感染非分裂细胞如神经元细胞,接种后不再增殖,可按照 100% 的汇合度进行接种。 3、慢病毒感染原代细胞效率较低,若需要构建稳转株使用慢病毒感染,为提高感染效率可使用助转剂 polybrene,但部分细胞对 polybrene 比较敏感,可以用 1-10ug/mL 的范围筛选合适的浓度,以 24h 内细胞无明显毒性反应为佳。也有部分细胞不可添加,需要提前查阅文献资料确认,以免影响后续实验。 图 2:腺病毒感染海马神经元原代细胞 三、原代 T 细胞 原代T细胞较「娇嫩」,针
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