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文献和实验佛波酯(phorbol esters)和钙离子载体诱导的CTL颗粒酶释放分析法 【基本原理】 用佛波酯(phorbol esters)和钙离子载体处理CTL,通过一种TCR复合物非依赖性机制,刺激CTL细胞颗粒酶的胞泌作用。 【试剂及材料】 (1) 1mg/ml十四酰佛波乙酸酯(phorbol myristate acetate,PMA)二甲亚砜溶液。 (2) 1mg/ml钙离子
七,2720定醛基。 吸电效应波数高,共轭则向低频移。 张力促使振动快,环外双键可类比。 二千五到三千三,羧酸氢键峰形宽, 920,钝峰显,羧基可定二聚酸、 酸酐千八来偶合,双峰60严相隔, 链状酸酐高频强,环状酸酐高频弱。 羧酸盐,偶合生,羰基伸缩出双峰, 1600反对称,1400对称峰。 1740酯羰基,何酸可看碳氧展。 1180甲酸酯,1190是丙酸, 1220乙酸酯,1250芳香酸。 1600兔耳峰,常为邻苯二甲酸。 氮氢伸展三千四,每氢一峰很分明。 羰基伸展
。 3、诱导液(TPA):12-邻-十四酰-佛波醇-13-乙酸酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)溶于丙酮,配成20mg/ml。 二、实验步骤 (一) 、用96孔细胞培养板制备贴壁细胞抗原(正常贴壁细胞) 1、HFF,NIH3T3细胞用含10%血清DMEM完全培养液在75cm2培养瓶中单层培养,使密度达到90%
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