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- 北京
- YT206-ITG
- 2025年07月12日
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-20℃
- 保质期：
一年
- 英文名：
ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
- 库存：
432
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)销*(代"售")在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM)销*(代"售")
产地：国产|进口
规格：60μl
品牌：百奥莱博
英文名：ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－ARE的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
EMSA突变探针－ARE的序列如下：
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"
EMSA突变探针－ARE中ARE的公认的位点发生了突变，从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和ARE的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1. 阴性对照反应(标记探针)；
2. 常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3. 探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4. 突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5. Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。
注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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（1）什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验？凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳上，分离复合物和非结合的探针。DNA复合物或RNA复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同，可是双链或者是单链
实验时间 | 还在为凝胶迁移实验（EMSA）发愁？老司机为你指路
实验步骤01 探针的标记如下设置探针标记的反应体系：体系为 10 微升待标记探针 （1.75 pmol / 微升） ：2 微升。T4 Polynucleotide Kinase Buffer （10×） ：1 微升。Nuclease-Free Water ：5 微升。[γ-32P] ATP（3 000 Ci/mmol at 10 mCi/ml） ：1 微升。T4 Polynucleotide Kinase （5-10 u / 微升） ：1 微升。依次加入各种试剂，加入同位素后混匀，再加入 T
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