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文献和实验for this protocol.)2. Wash the oligo dT cellulose 3X with 750 l 1X NETS. (Spin down gently between washes and aspirate off the wash.)3. Aspirate off final 1X NETS wash and resuspend the cellulose in 750 l 2X NETS.4. Incubate the RNA at 65 !C for 10 minutes.5. Add
相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
杂菌污染,如果抽得质粒全是杂菌的话,测得浓度和OD值会不会和正常的质粒不一样呢? laforet 4小时能提出50ng已经不错了,10毫升菌液杂质也会相应增加,内毒素会影响转染效率的。 LB摇菌对质粒小抽来说不太适合,建议用TB或SB加2mM MgSO4, 2-5毫升菌液保证供氧充分,摇24小时后加170ug/L氯霉素再摇2小时就能抽出微克浓度的质粒了。不知道你做什么样的转染,如果用量大的话完全可以做大抽。 卡那霉素用量建议
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