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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")20×SSC溶液打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:20×SSC溶液打折促销
规格:250mL
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
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20×SSC溶液打折促销关键词:20×SSC溶液,百奥莱博,BTN100405
·大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
编号:BTN80806
英文名称:E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补,可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。
菌株的基因型:F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
20×SSC溶液打折促销关键词:20×SSC溶液,百奥莱博,BTN100405
我公司生产的20×SSC溶液纯度高价格低,质量有保证,客户更放心。我们为科研用户提供上千种生物试剂现货及sigma全线产品原装期货,货期短,价格低,质量好。用我们100%的真诚、热情换取您100%的信任与支持!
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20×SSC溶液为高校实验室,各大科研单位专用试剂,不得用于生产或者其它用途,本公司提供各种品牌的进口的试剂来满足不同客户的需求,欢迎前来订购!
20×SSC溶液怎样保存?
一般试剂可保存在玻璃瓶内; 对玻璃有强烈腐蚀作用的试剂,如**酸、*氧化*应保存在聚乙*(代"烯")塑料瓶内; 易被空气氧化、分化、潮解的试剂应密封保存;易感光分解的试剂应用有色玻璃瓶贮存并藏于暗处; 易受热分解及低沸点溶剂,应存于冷处; 剧毒试剂应存于保险箱; 有放射性的试剂应存于铅罐中。如果化学试剂保管不当,就会失效变质,影响实验的效果,并造成物质的浪费,甚至有时还会发生事故。因此,科学地保管好试剂对于保证实验顺利进行,获得 可靠的实验数据具有非常重要的意义。
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文献和实验20×SSC溶液 【配制方法】 在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。 (责任编辑:大汉昆仑王)
膜或尼龙膜并剪去一角作为标记,水浸湿后,浸入转移液中 5 min。剪一张比膜稍宽的长条 Whatman 3 mm 滤纸作为盐桥,再按凝胶的尺寸剪 3~5 张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。(转移过程一般需要 8-24 hr,每隔数 hr 换掉已经湿掉的纸巾。转移液用 20× SSC。注意在膜与胶之间不能有气泡。整个操作过程中要防止膜上沾染其他污物。)4. 转移结束后取出 NC 膜,浸入 6× SSC 溶液数 min,洗去膜上沾染的凝胶颗粒,置于两张滤纸之间,80 °C 烘 2 hr
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。2)去离子甲酰胺(DF):将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min,用Whatman l号滤纸滤。3)体积分数70%甲酰胺/2×SSC:35mL甲酰胺,5mL 20×SSC,10mL水。4)体积分数50%甲酰胺/2×SSC:100mL甲酰胺,20mL 20×SSC,80mL水。5)体积
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