北京NP40裂解液厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京NP40裂解液厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京NP40裂解液厂家
英文名：NP40 Lysis Buffer
规格：250mL
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。

产品特点：
1．本产品裂解能力强度温和，对膜蛋白的处理能力一般；对核蛋白的提取能力较好；对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2．本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3．本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate，β-glycerophosphate，sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。
4．用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1．融解NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2．对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150～250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-～250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3．充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
 裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

对于组织样品：
1．把组织剪切成细小的碎片。
2．融解NP-40裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3．按照每20mg组织加入150～250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4．用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5．充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6．如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

备注：
1．为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2．裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

北京NP40裂解液厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·植物叶绿体纯化试剂盒
编号：BTN120308
英文名称：Plant Chloroplast Purification Kit
规格：15次
叶绿体是重要的，负责植物光合作用的细胞器，很多重要的特性(如雄性不育)也跟叶绿体相关，所以叶绿体是研究植物生理和母系遗传的重要材料。对植物叶绿体进行生化，遗传和分子生物学研究都需要进行叶绿体纯化。本产品就是基于密度梯度离心的，专门用于从植物叶片中纯化完整叶绿体的试剂盒。

产品特点：
1．即用型试剂盒，用户不需要单独配制各种溶液。
2．提供AB两种选择，A型用于叶绿体粗提，所得叶绿体含少量其他细胞器污染，可用于后续的SDS-PAGE，Western，ELSIA和蛋白组分析。B型用于叶绿体精提，所得叶绿体完整，可用于后续的光合作用，电子链和磷酸化，跨膜转运，体外叶绿体蛋白合成，蛋白定位等研究。还可用于的叶绿体膜，基质，类囊体，叶绿体DNA和叶绿体RNA纯化。
3．本产品足够15次提取，每次可处理30g叶片，能得到5mg左右叶绿体。
4．已经成功用于菠菜，大豆，莴笋，白菜，烟草和甜菜等植物，还可用于更多植物(可能需要优化条件)。


试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A成分一	250ml×2
溶液A成分二(干粉)	3g
溶液B	60ml
带柄尼龙滤膜	1个
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，保存期限一年。

使用方法：
注意：叶绿体对温度高度敏感，所以整个操作必须在冰上或者在冷室进行，所用器皿和溶液均需要在4℃预冷。离心时一定要在4℃进行，离心力以g而不是rpm计算。如果需要研究叶绿体的功能，提取过程还需要在昏暗的光线条件下进行。

1．实验前1-2天将植物放在暗室培养以减少叶绿体中淀粉颗粒的形成，否则离心时这些颗粒很容易使叶绿体破裂。叶片在实验前需先用自来水洗净，再用蒸馏水淋洗，去掉多余水分。如果叶片采集后不能立即处理，则保存时需要保持叶片湿润，即使如此，叶片的放置时间也不能超过一天。
2．新鲜(实验当天)制备溶液A：将自备的去离子水与溶液A成分一按4：1的比例混合，然后在混合液中加入溶液A成分二干粉到终浓度0.1%(每100mL中加入0.1g干粉)，摇晃溶解后所得溶液即为溶液A，冰上预冷待用。一次实验(从30 g叶片提取叶绿体)所需要的溶液A体积跟材料不同而不同。
3．新鲜采集植物叶片，快速去除叶脉并将叶片剪成1-3cm2大小的碎片并浸泡在适量的预冷的溶液A中(每克叶片加4mL溶液A，但对烟草和大豆，每克叶片需要加6mL溶液A)。
4．将浸泡了叶片的溶液A转移到Waring匀浆机(即家用制备果汁的匀浆机)中，低速匀浆10秒，避免起泡沫。用玻璃棒把液面的碎片按入匀浆机底部后，再低速匀浆10秒。注意：除Waring匀浆机外，还可以选择Dounce玻璃匀浆器，Polytron匀浆机和研磨(加玻璃珠)等裂解细胞的方法，但这些方法的单次处理量都比较小，需要将样品分成很多小份单独匀浆，然后再汇集。
5．用带柄尼龙滤膜过滤匀浆液，可先将滤液收集到预冷的200mL量筒中，再等分到4个预冷的50mL的塑料离心管中(每个管中的滤液不要超过35mL)。带柄尼龙滤膜后可反复使用。
6．在水平转子离心机上4℃ 200g离心3分钟(对菠菜，白菜和莴笋材料)或400g离心1分钟(对甜菜材料)，白色沉淀为未破裂的细胞或细胞核。
7．将上清液(含叶绿体)转移到一个新的、预冷的50mL塑料离心管中。
8．在水平转子离心机上4℃ 1000g离心7分钟，小心弃上清，沉淀含叶绿体，呈浅绿色。
9．在沉淀中加入1.5mL预冷的溶液A，手弹离心管底部使叶绿体重悬。注意：重悬时最好避免溶液起泡，也不要用枪头吹打，否则叶绿体容易破裂。沉淀下有白色淀粉属于正常现象，但重悬叶绿体时避免将白色淀粉重悬。
10．将4管叶绿体重悬液汇集(共约6mL)。此溶液为叶绿体粗提产物，可直接用于后续的SDS-PAGE，Western，ELISA和蛋白组分析。如果需要以之为材料精提叶绿体，就需要将破裂的叶绿体和完整的叶绿体分开，根据植物的不同，可选用下述两种密度梯度离心法之一进行分离。
11．单浓度分离法(适合菠菜，白菜和莴笋等材料)：
a)在50mL塑料离心管中先加入6mL溶液A成分一和4mL溶液B，充分混合均匀。
b)在其液面上小心铺上第11步汇集得到的约6mL叶绿体重悬液。
c)在水平转子离心机上4℃ 1000g离心8分钟，最上层的绿色带含破碎的叶绿体，线粒体和核糖体等，管底的绿色沉淀为完整的叶绿体。
d)小心将上清倒出后，在叶绿体沉淀中加入预冷的0.5mL溶液A成分一，手指轻弹管底使之重悬。
e)将叶绿体重悬液转移到1.5mL离心管中并避光保存。可在相差显微镜下检查叶绿体完整性。叶绿体必须尽快使用，否则非常容易失去活性。
12．双浓度分离法(适合烟草，甜菜和大豆等材料)：
a)在14mL塑料离心管中先加入0.5mL溶液A和2mL溶液B，充分混合均匀，得密度梯度重液。
b)在另一试管中将3mL溶液A和2mL溶液B充分混合均匀，得密度梯度轻液。
c)将密度梯度轻液小心铺在密度梯度重液之上，然后将第10步汇集得到的叶绿体重悬液中的4mL(还剩下2mL)小心铺在密度梯度轻液之上。
d)在水平转子离心机上4℃ 3200g离心15分钟，最上层绿色带含破碎的叶绿体、线粒体和核糖体等，重液和轻液间的绿色带为完整叶绿体。
e)用广口吸管小心将重液和轻液之间的绿色带(叶绿体)转移到新的离心管中，加入三倍体积的预冷的溶液A成分一，轻柔混匀。
f)在水平转子离心机上4℃ 1700g离心1分钟，小心将上清倒出后，在绿色的叶绿体沉淀中加入预冷的0.5mL溶液A成分一，手指轻弹管底使之叶绿体重悬。
g)将叶绿体重悬液转移到1.5mL离心管中并避光保存，也可在相差显微镜下检查叶绿体完整性。叶绿体必须尽快使用，否则非常容易失去活性。所得精提叶绿体可用于后续的光合作用，电子链和磷酸化，跨膜转运，体外叶绿体蛋白合成，蛋白定位等研究。还可用于的叶绿体膜，基质，类囊体，叶绿体DNA和叶绿体RNA纯化。


北京NP40裂解液厂家关键词：NP40裂解液,NP40 Lysis Buffer,BTN131009
  我公司位于北京市海淀区，是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材研发、销*(代"售")、服务为一体的生物科技公司，公司主要经营的进口品牌包括Sigma,Invitrogen,Roche,Abcam,BD, R&D,GE,Amresco,Merck等；产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材等。百奥莱博秉承博采众长、诚信为本、德行天下的宗旨服务于客户。公司合作单位及客户包括各大医院、科研机构、大专院校、制药单位、医学检验单位、卫生防疫、生物技术公司、食品单位等诸多领域，正逐步成长为一流的生化试剂和耗材供应商。 我们将一如既往的为您提供优质的产品和完善的售后服务。



·T7 DNA聚合酶(未修饰)
编号：BTN130618
英文名称：T7 DNA Polymerase(Unmodified)
规格：300U
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性，DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率，因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成，T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。

产品特点：
1．缺口填充(无链置换活性)。
2．定点突变中第二链的合成。
3．具有快速延伸的特性，故无需长时间温育。
4．T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。

产品组成：

成分	规格
T7 DNA聚合酶(10U/μL)	30μl
10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液	1.5ml
BSA溶液(10mg/mL)	0.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：对于不同的实验，各成分用量及反应时间可能不同，请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液，加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs，37℃温育。

热失活：75℃下反应20分钟。

单位定义(粘性末端活性单位)：1 单位指在37℃条件下反应30分钟，能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。

贮存液成分：50mM KPO4，1mM DTT，0.1mM EDTA，50%甘油，pH7.0@25℃。


北京NP40裂解液厂家关键词：NP40裂解液,NP40 Lysis Buffer,BTN131009
  我公司主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的研发、销*(代"售")。并代理销*(代"售")R&D、Sigma、Amresco 、Gibco、Pharmacia、HyClone、GIBCO等多个国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。 公司主要产品：试剂盒：NP40裂解液、ELISA试剂盒、分子生物学试剂、细胞凋亡试剂盒。各种动物血清：NBQQ、HyClone、GIBCO胎牛血清。抗体：进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、一抗、二抗。 我们立足于生命科学领域，全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链，立志成为生命科学研究领域的问题解决专家。


BL1346 PH值标准液(PH10.01)
F030642 FITC标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY*FITC
D0601 脱纤维兔血(无菌 pet瓶装)
N,N-二甲基对*撑二胺 HBPYU 536-46-9
389-08-2 Nalidixic acid  *啶酮酸
F030622 FITC标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*FITC
11028-71-0 刀豆蛋白A Ⅳ ConA Type A Ⅳ
HC0163 双面离心管架
ARB11601 人偏肺病毒IGM(HMPV)ELISA代测服务 
9002-07-7 Trypsin 1:250  胰蛋白酶1:250
10030-85-0 L(+)鼠李糖 L-Rhamnose
ARB12818 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)检测服务 Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,dppⅣ ELISA KIT
F030434 胶体金标记山羊抗人IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*GOLD
ARB13114 小鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)酶标法分析 Mouse helicobacter pylori igg,hp-igG ELISA KIT
ARB12376 大鼠质细胞源性神经营养因子(GDNF)elisa测定使用说明书 Rat glial cell line-derived neurotrophic factor,gdnf ELISA KIT
H1301 大鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)
BTN131098 生物素化蛋白G Biotin-Protein G
F020216 兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG
F040101 牛血清白蛋白偶联克伦特罗 BSA-CLE

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