BTN70705型DNA洗脱液现货促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN70705型DNA洗脱液现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN70705型DNA洗脱液现货促销
编号：BTN70705
品牌：百奥莱博
规格：10mL

更多有关BTN70705型DNA洗脱液现货促销的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿)
编号：BTN160905
英文名称：Animal RNA column extraction kit(chloroform-free)
规格：50次
本试剂盒是在本公司柱式动物总RNA快速提取试剂盒基础上升级的免*仿产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。

试剂盒特点：
1. 免去*仿抽提步骤，操作更加简单快速，整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. 不使用有毒的*仿，健康环保。
3. RNA纯度很高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 所得RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
7. 性价比高于进口的柱式RNA

试剂盒组成：

 

组分	编号	规格
溶液A	BTN71201A	50mL
溶液B	BTN71201B	25mL
离心吸附柱	BTN90303	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
RNA洗脱液	BTN71207	10mL
使用手册		1份

储存条件：常温运输和保存，但溶液A需要4℃保存，有效期一年。

使用方法：
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的，如果处理样品量大，请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。

1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用：
a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入1mL溶液A，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106悬浮细胞中加入1mL溶液A，用枪轻柔吹打数次，确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell，1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织：先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加1mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A，否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold保存组织：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中，12000rpm室温离心3～5分钟。
3. 将上清液(残留沉淀为每裂解的细胞和组织)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
4. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。
5. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
6. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
7. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加0.3mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free收集管中，加入50-100μL RNA洗脱液。
11.室温12000 rmp离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA的电泳检测：本试剂盒提取的RNA最好用甲醛变性胶电泳，如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳，一定要使用RNA专用上样液RNAload(操作详见RNAload使用手册)，千万不要使用常用的DNA上样液，因为DNA上样液没有经过去RNase处理，也不能将RNA变性，得到的带型将十分杂乱。
13. RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。



BTN70705型DNA洗脱液现货促销关键词：百奥莱博,DNA洗脱液,BTN70705


·链霉亲和素磁珠
编号：BTN130521
英文名称：Magnetic beads binding with streptavidin
规格：2mL
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物，如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一，因此，这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合，而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合，而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性，捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。

产品特点：
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化，更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度：1%磁珠含量；
 固相载体：超顺磁性硅基磁珠；
 磁珠粒径：1μm；
 pH耐受范围：2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠)：﹥3000pmol游离生物素；﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸；﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液：10mM PBS，0.1% BSA，0.05% sodiu*(代"m") azide，0.1% Tween20。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液，用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中，通过磁力架磁分离后弃上清。
 注：磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次，以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品，室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长)，置于磁力架上进行磁分离，弃上清，并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速，且结合后不受pH，温度，有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素，与偶联复合物的生物素数据有明显差异)，用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表：

洗脱温度和时间	洗脱溶液	洗脱效率
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
90℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
90℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
65℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
65℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	97.9%
37℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	41.9%
90℃ for 10min	H2O	7.3%
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2	52.0%
90℃ for 10min	95%甲酰胺	35.9%
90℃ for 10min	30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.5%
90℃ for 10min	80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	97.3%
90℃ for 10min	140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.4%

使用举例：
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中，加入无菌去离子水至终体积为500μl(注：总RNA 量可低至50μg，但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到，需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中，温和混匀，室温放置至完全冷却，这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠：将链霉亲和素磁珠充分混匀后，取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内，放在磁力架上，待磁液分离后，移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠，放在磁力架上磁液分离，移除上清，重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min，期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠，小心移除上清，过程中不要触碰到磁珠，该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠，然后置于磁力架上分离磁珠，磁液分离后小心移除上清，重复三次，最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液)，温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠，将上清转移到一个新的无RNase的离心管内，不要触碰到磁珠(注：如果在转移过程中将磁珠悬起，可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。

链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠：链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性，故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
 注：在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS，IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀，置于磁力架上分离磁珠，去除上清，该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠，放于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复洗两次。PBS 重悬磁珠，使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内，室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态，以达到好的结合效率。反应结束后，置于磁力架上，磁液分离后，用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注：该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠，置于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。


BTN70705型DNA洗脱液现货促销关键词：百奥莱博,DNA洗脱液,BTN70705
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·抗凝血酶Ⅲ(10mg/mL)
编号：BTN130534
英文名称：Antithrombin III Solution
规格：1mL
本产品为抗凝血酶Ⅲ水溶液，浓度为10mg/mL,pH=7.0-9.0。工作浓度为1 Inh.U/mL。抗凝血酶Ⅲ(抗纤维蛋白酶Ⅲ，ATⅢ，antithrombin Ⅲ)是一种维生素K依赖的单链糖蛋白，分子量是65000。属丝*酸蛋白酶抑制剂，可以抑制血液凝固过程中的所有丝*酸蛋白酶(凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα等等)的活性，也可以抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等。

活力单位定义：一个抑制单位Inh.U是指，在肝素存在下，ATⅢ灭活一个单位的25℃，pH8.1的凝血酶。

储存条件：低温运输，4℃一周内稳定。

·嘌呤霉素干粉
编号：BTN100840
英文名称：Puromycin Powder
规格：25mg
嘌呤霉素为白色结晶。有吸湿性。对光敏感。微溶于水和有机溶剂，易成为水溶性的双盐*(代"酸")盐及单硫*(代"酸")盐。熔点175.5~177℃。是蛋白质合成抑制剂，阻止细菌、藻类、原生动物和哺乳动物细胞的生长。

作用原理：通过特异性地抑制原核及真核核糖体上的*酰转运，使未成熟链合成终止，从而阻碍蛋白质合成。

抗性机制：抗性基因pac编码嘌呤霉素N-乙酰-转移酶。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期6个月。

·三合一RNA上样液(B型,6X)
编号：BTN3130B
英文名称：RNA Loading Buffer
规格：1.5mL
本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。

产品特点：
1．能提高RNA上样速度，免去繁琐的准备步骤，减少污染。
2．其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性，保证电泳过程中RNA的完整性。
3．所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料)，便于直接上样和UV观察RNA电泳条带，免去染色和脱色过程。
4．本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。

产品组成：

成分	规格
三合一RNA上样液	1.5ml
说明书	1份

本产品为红色液体，含红色的EB(*化乙锭)，有致癌性，避免用手直接接触。
另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。

储存条件：常温运输，4℃(短期)或-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
 注：本产品含EB，所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果，RNA 条带成红色。

疑难解答：
Q：为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
A：这是因为在非变性胶中，即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳，而在变性胶中，完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动，所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况，非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。



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