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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Verhoeff Fixative Solution
- 库存:
413
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Verhoeff固定液批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Verhoeff固定液批发
规格:250mL
品牌:百奥莱博
编号:BTN140588
产地:国产|进口
英文名:Verhoeff Fixative Solution
本产品为眼球常用固定液,主要成分为甲醛、酒精、苦味*(代"酸")。固定48h后,即可脱水。固定于Verhoeff固定液中的眼球可以长期保存。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
想要了解更多关于Verhoeff固定液批发的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化学感受态细胞
编号:BTN140430
英文名称:E.coli OmniMAX2-T1 Phage Resistant Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达10⁹。本产品具有四环素抗性。
菌株基因型为:F- {proAB+ lacIq lacZΔM15 Tn10(TetR)Δ(ccdAB)} mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169 endA1 recA1 supE44 thi-1 gyrA96 relA1 tonA panD
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
Verhoeff固定液批发关键词:Verhoeff Fixative Solution,BTN140588,Verhoeff固定液
·柱式土壤RNA提取试剂盒
编号:BTN90705
英文名称:Soil microbe RNA Column extraction kit
规格:50次
·miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)
编号:BTN90203
英文名称:miRNA isolation Kit(precipitation method)
规格:50次
microRNA(miRNA)和RNA干扰研究是当今分子生物学研究的一大热点,但快速分离和纯化相关的小RNA十分棘手,是目前研究 miRNA的主要技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几,并且基本采用先提总 RNA 再富集其中的小RNA的两步法策略,国内相关产品更是一片空白。百奥莱博为满足广大用户的需求,开发了具有自主知识产权的本产品。
试剂盒特点:
1.从总 RNA中直接分离纯化小RNA,不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA 长度大部分在 200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 操作简单快速,整个过程只需要约30分钟。
3.小RNA 纯净,OD260/280一般都在 1.9以上。
4.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA,但会有少量残留大 RNA,如果需要纯度更高,可以选择 PAGE 回收法。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 5ml |
| 溶液B | 10ml |
| 溶液C | 50ml |
| RNase-free 水 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在纯化好的100μl 总 RNA(含大 RNA和小RNA)中,加入50μl溶液A,振荡 30秒混匀。如果 RNA样品体积不足 100μl,可以用RNase-free水补足,如果体积超过 100μl,可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到 100μl。
2.室温 12000~15000g离心 30分钟。小RNA在上清中,大 RNA在沉淀中。
注意:离心时间不能短于30分钟,否则大 RNA沉淀不充分。
3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA电泳对照用。
4.在上清液中加入200μl溶液B,振荡 30秒混匀。
5.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂,所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。
6. 加入1mL溶液C,震荡数秒。
7.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。
8. 短暂离心数秒,小心吸弃残留液体(约50μL左右)。
9.在沉淀中(含小RNA)加入30-100μl RNase-free 水,吹打溶解即得小RNA溶液。注意:不能只吹打管底部分,还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分,因为上面也有有小RNA沉淀。
10. 最好先 PAGE-银染检测小RNA 纯度再使用。
Verhoeff固定液批发关键词:Verhoeff Fixative Solution,BTN140588,Verhoeff固定液
·辛甲基β葡糖苷
编号:BTN131044
英文名称:Octyl-β-Glucoside
规格:1g
本产品是一种广泛用于溶解膜蛋白的非离子型去垢剂。低分子量,可通过透析去除。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·血液RNA提取试剂盒
编号:BTN3071
英文名称:Blood RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒是专门从全血样品中快速提取总RNA的试剂盒,主要用于提取全血细胞的总RNA(提取血浆病毒RNA 需使用病毒RNA提取试剂盒,提取纯化后的白细胞RNA可使用动物RNA提取试剂盒)。
试剂盒特点:
1. RNA 无明显降解和DNA污染,OD260/280 均在1.9以上。血液RNA的产量与动物种类和动物的状态(如有疾病与否)有很大关系,人全血产量为2-6μg/mL,兔全血产量为5-10μg/mL。
2. 操作简单,直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品,不需裂解红细胞等任何预处理步骤,整个提取过程只需要十多分钟,可以全在室温下进行。
3.处理量大,每管的样品处理量可以达到1.5mL,高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素,EDTA,柠檬酸*,草酸*)兼容,得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。
试剂盒组成:
| 成分 | 50T |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 25ml |
| 溶液D | 25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,溶液B和溶液C有腐蚀性。4℃保存的溶液A可能会产生白色沉淀,用前需65℃水浴加热直到沉淀溶解。有效期一年。
使用方法:
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中,15000g室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。如果提取0.1mL以下的微量血液样品最好加入百奥莱博的微量助沉剂RNApp。
2. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
3. 将0.3mL的溶液B和0.2mL *仿加入离心管,剧烈震荡30秒。
4. 13000-15000g室温离心5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染,最好留100μl左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
5. 加入0.5mL的溶液C和0.2mL的*仿到上清液中,用手上下剧烈摇晃30秒。
6. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清液(无色,约1mL)转移到另一干净离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物(蛋白质)。可以按每次吸取100-200μl的方式分批转移。
7.在上清液中加入1/2 体积的溶液D,用手上下剧烈摇晃30秒,溶液将呈白色浑浊状。
8. 13000-15000g室温离心5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色RNA沉淀。
9.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
10. 重复第9 步的75%乙醇清洗步骤一次。
11. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
12.室温短暂放置2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)溶解液使RNA沉淀溶解。建议使用具有灭活残留RNase 功能的新型RNA 溶解液液相RNase Scavenger 而不要使用经典的DEPC 水。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。
疑难解答:
1.有的样品在第4 步离心后有很厚的中间层,上清很少。原因是蛋白质变性不充分,可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
2.有的样品在加入溶液D离心后,沉淀上浮在液面,这是由于液体的比重大于沉淀,可以加入少量的超纯水使溶液的比重降低,直到沉淀能下去为止。也可能把下层的有机相取上来了,如果这样需要重做。
3.千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则将变得十分难溶。
4.无论使用甲醛变性胶还是非变性胶电泳时,一定要使用RNA变性/上样液(如百奥莱博的RNAload)以让RNA 充分变性,否则加样孔中会有RNA复合物(人们会误以为是DNA污染)。使用没有变性能力的DNA上样液不能使RNA 复合物分离。
5.测OD时一定要使用pH8.0的缓冲液(如TE),不要使用微酸性的DEPC水,否则OD 值会比真实的值低15-20%。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购Verhoeff固定液批发。
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文献和实验)混合使用。 2.酸性复红易被水洗掉,而苦味酸易被酒精洗脱,故在分色脱水时都应快速。由于V-G为较强的酸性染液,切片放置过长易褪色。 2.Masson三色染色法 Masson三色染色法是由Mallory氏苯胺蓝菊黄G发展改良而来,但对于固定液有一定的选择性,虽然任何固定液固定后的组织可进行染色,但最好是用Zenker氏固定液或Bouin氏固定液固定组织。福尔马林固定的标本切片在染色前以3%升汞作第二次固定一小时以上,则可增强着色效果
深紫色,其它组织成分呈棕黄色和淡紫色。 Masson(三色trichrom)特殊染色液的稳定性 ·Bouins固定液 2个月 ·Weigert苏木精 贮存液:4个月 工作液:1周 ·猩红(Biebrich scarlet)-酸性复红液 2个月 ·磷钼-磷钨酸 工作液:1个月(液体一次性使用,不回收) ·苯胺蓝 2个月
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