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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
Proteinase K Solution
- 库存:
990
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应蛋白酶K溶液折扣价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:蛋白酶K溶液折扣价
编号:BTN80911
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Proteinase K Solution
规格:5mL
本产品是浓度为10mg/mL的蛋白酶K溶液,可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
除蛋白酶K溶液折扣价外,我公司正在打折促销以下产品:
·包涵体蛋白溶解及复性套装
编号:BTN100302
英文名称:Inclusion Body Protein Solubilization & Refolding Pack
规格:100次
本产品用E.coli作为宿主表达得到的重组蛋白往往会形成包涵体,其中的重组蛋白质只完成部分折叠,还没形成最后的正确空间结构,所以没有生物活性,要得到有活性的重组蛋白,还需要后续的溶解和复性(重折叠)处理。目前最常用的溶解包涵体的方法是用尿素,Sarkosyl,盐*(代"酸")胍等强变性剂,其缺点是包涵体中的重组蛋白质被彻底变性,使后续的蛋白质复性处理效率降低。本产品根据包涵体中的重组蛋白质已经完成了部分折叠这一实事设计。
产品特点:
1.一站式,提供包涵体洗涤、溶解和蛋白质复性的所有试剂。
2. 采用温和法溶解包涵体,释放的包涵体蛋白质不彻底变性,还能保持其部分折叠的结构,使后续的复性处理效率提高。
3. 所用复性液基于稀释复性,经过精心优化,有利于大部分蛋白的复性。
4.还提供五种不同的添加剂,它们可以单独加入复性液,也可以按一定比例进行自由组合,以适应不同的蛋白质折叠需求。
5. 本试剂盒提供实惠的小规格,用于做预实验用,用户如果选择到合适的溶液组合后,可以单独购买其中的溶液以用于大量制备。
6. 本试剂盒足够100次小规模(1mL规模)的蛋白质复性实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 包涵体洗涤液 | 250mL |
| 包涵体温和溶解液(10种各一套) | 10×10ml |
| 包涵体蛋白质复性液 | 250ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂:去离子水、BCA蛋白浓度测定试剂盒、0.22μm注射器式滤膜。
使用方法:
一、洗涤包涵体
说明:用常规方法得到的包涵体常常含有去污剂和细胞碎片,因此需要经过充分的洗涤才能用于本实验。
1.将10mg包涵体沉淀溶解在5mL包涵体洗涤液中,超声波处理8次或充分吹打混匀。可以适当留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
2.4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
3.重复上面的洗涤步骤3次,每次留取10-30μL作为SDS-PAGE电泳样品待用。
4.将包涵体沉淀溶解在1mL包涵体洗涤液中,超声波处理8次或充分吹打混匀。
5.检查包涵体的纯度:将上步得到的包涵体溶液和前几步得到的预留样品一起用于SDS-PAGE电泳,检查每次洗涤去除杂带的情况。
6.检查包涵体的浓度:用自备的BCA蛋白检测试剂盒测试第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度。
7.将第4步得到的包涵体溶液的蛋白质浓度调到5-10mg/mL(如果低于此范围,则离心后用适量的洗涤液再溶解;如果高于此范围,则用洗涤液稀释),然后均分到10个1.5mL塑料离心管中,每管100μl。
8.4℃ 12000rpm离心20分钟后弃上清。
9.所得沉淀即纯化的待用的包涵体。
二、确定溶解包涵体的最佳条件
1.标记上步得到的10个离心管,并分别加入10种包涵体温和溶解液,每种1mL。注意:准确记录它们的对应关系。
2.充分振荡后,室温放置30分钟。
3.450nm检测浑浊度并记录下数据。
4.4℃ 12000rpm离心10分钟后收集上清,此即包涵体溶解液。
5.用0.22μm注射器式滤膜过滤包涵体溶解液。
6.280nm检测包涵体溶解液的光吸收。
7.溶解液溶解包涵体能力跟包涵体溶液浊度跟成反比,跟包涵体溶解液中OD280数值成正比。根据上面的数据即可确定哪种溶解液对实验中所用包涵体具有最佳溶解能力,并将在此溶解液中溶解的包涵体溶解液用于下面的复性实验。大量处理需要从本公司单独大量订购包涵体温和型溶解液10种中的1种。
三、包涵体蛋白的复性
1.在2.5mL 4℃预冷的、处于轻柔搅拌中的复性缓冲液中,逐滴加入上步得到的包涵体溶解液。
2.待所有包涵体溶解液都加完后,将包涵体蛋白复性溶液用孔径为0.22μm注射器式滤膜过滤,除去包涵体(直径一般在0.5-0.8μm)和大的聚合物。
3.将得到的溶液用于活性检测或离子交换柱层析和分子筛层析。
蛋白酶K溶液折扣价关键词:BTN80911,Proteinase K Solution,蛋白酶K溶液
ARB14075 人腺病毒Ⅶ抗体(AdenovIrus Ⅶ-Ab)含量检测
HC0009 细胞培养板
RN3601 "Allprep 组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒
硝*吡*(代"啶") Clarithromycin 21829-25-4
NF-267 HBS阳性对照
BTN70604 miRNA PAGE胶回收试剂盒 PAGE miRNABACK
ARB12515 大鼠热休克因子1(HSF1)elisa检测说明书 Rat heat shock factor 1,hsf1 ELISA KIT
PY02-394 AC肉汤培养基 250克
ARB10550 human皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)含量检测 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,cla ELISA KIT
BTN131131 细菌种属鉴定PCR Mix Bacterial DNA Barcoding PCR Mix
ARB13260 小鼠鼠痘病毒(MPV)ELISA检测服务 Mouse poxvirus ELISA KIT
DL-乳酸* OVA 72-17-3
ARB11541 人高密度脂蛋白(HDL)Elisa分析 Human high density lipoprotein,hdl ELISA KIT
ARB11589 人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)elisa检测操作说明书 Human matrilysin,mat ELISA KIT
L-脯*酰胺 Phenazine ethosulfate 7531-52-4
ARB13717 兔前列腺素E2(PGE2)血清中含量检测 Rabbit prostaglandin e2,pge2 ELISA KIT
ARB12448 大鼠*结合蛋白(CR)ELISA代测服务 Rat calretinin,cr ELISA KIT
ARB10579 人同型半胱*酸(Hcy)含量分析 Human homocysteine acid,hcy ELISA KIT
ARB10554 人孕激素/孕酮(PROG)elisa测定使用说明书 Human progesterone,prog ELISA KIT
HC0038 黑色酶标板(不可拆)25块/包
BL0889 兔抗生物素免疫血清 0.5ml
ARB10228 人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)尿液中含量检测 Human β-glucuronidase,βgd ELISA KIT
蛋白酶K溶液折扣价关键词:BTN80911,Proteinase K Solution,蛋白酶K溶液
·放线菌*(代"素")D
编号:BTN120680
英文名称:Actinomycin D Solution
规格:1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素;Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16,分子量:1255.41。可作为代谢抑制剂,细胞质膜研究。它能抑制RNA的合成,作用于mRNA,干扰细胞的转录过程,阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。
抗性机制:放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构,通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用,使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中,与DNA形成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,抑制RNA的合成,特别是mRNA的合成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
我公司正在打折促销工具酶全系列产品,恭候您的咨询选购蛋白酶K溶液折扣价。
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文献和实验%,70%,50%,30%各5min。入PBS(含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3~7.4)10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 (3)50℃2×SSC,含5mmol/l EDTA溶液中30min。 (4)蛋白酶K(1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中,)37℃20~25min。 (5)0.2mol/l 甘氨酸液:室温10min,中止蛋白酶反应。 (6)4%多聚甲醛(PBS新鲜配制):室温20
冻存于-20°C.样品采用蛋白酶K处理可使相邻肽段剪切成羧基团的芳香族氨基酸和脂肪族氨基酸。蛋白质和DNA之间的交联通过DNA的纯化被打断。3检测DNA浓度,取5ul纯化的DNA到995ulTE中得到一个原溶液的200倍稀释测其OD260。那么DNA的浓度就为OD260x10,000.μg/ml。这样就可计算出染色质制品的DNA浓度。4 免疫共沉淀1 从2.2得来的染色质制品,推荐每个IP样品都采用25ug的DNA的量。每个样品按1:10的量加入RIPA溶液。需要一个样本作为空珠子的对照。2在除空
] 酸性亚硫酸钠(sodium bisulfite )处理组织切片20-30分钟。7. 于2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟8. 取0.4ml蛋白酶K储存液(20mg/ml)溶于40ml 20XSSC(pH 7.0)得到蛋白酶K工作液(200µg/ml);将组织切片浸泡在蛋白酶K工作液中,37℃下孵育20-30分钟。9. 组织切片经蛋白酶K消化后,于2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟。特别说明:为确保消化充分,可以自然干燥组织切片,将15µl DAPI复染剂滴加于组织切片区域,立即盖上
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