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310
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
GAL Indicator Medium
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应GAL指示剂培养基厂商,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:GAL指示剂培养基厂商
英文名:GAL Indicator Medium
品牌:百奥莱博
规格:250mL
产地:国产|进口
编号:BTN130899
GAL指示剂培养基是一种用来记录半乳糖发酵能力的培养基,可以实时监测发酵过程产生半乳糖的能力。本产品为优化的MAL指示剂培养基,包含有菌株所需要的全部营养成分和指示剂,即开即用,方便使用。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
想要了解更多关于GAL指示剂培养基厂商的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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GAL指示剂培养基厂商关键词:GAL指示剂培养基,GAL Indicator Medium,BTN130899
·植物RNA提取专用高盐溶液
编号:BTN140402
英文名称:High-Salt Solution for Precipitation (Plant RNA extraction)
规格:250mL
植物RNA溶液中常富含多糖、多酚,会阻碍和影响后续实验。本产品主要用于去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已经提取的植物RNA溶液中或在使用植物RNA提取试剂盒(产品编号:BTN3080)提取植物RNA过程中加入本产品,再经过异丙醇沉淀,可以达到去除多糖、多酚的目的,得到高纯度的RNA。本产品具有下列特点:
1. 本产品不含DNase和RNase。
2. 经本产品处理后的RNA纯度高,可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
3. 本产品不能用于小分子量RNA中多糖、多酚的去除,会严重影响小分子量RNA的回收率。
4.在处理微量RNA样品时,在去除多糖、多酚的同时,RNA损耗也较大,此时可以添加百奥莱博产品微量核酸沉淀剂(BTN50903)以提高回收率。
使用及效果:
取RNA样品0.5倍体积的本产品与RNA样品溶液混匀,加入等体积异丙醇,室温放置10 min,12000rpm,4℃离心10 min,弃上清。加入1mL经RNase-free水配制的预冷的75%乙醇,12000rpm,4 ℃离心5 min。弃上清,室温干燥沉淀片刻。加入适量RNase-free水或TE Buffer溶解沉淀。

·超级杂交液(芯片)
编号:BTN130905
英文名称:Super hybrid solution(chip)
规格:10mL
基因芯片是将大量靶基因(DNA片段)有序地、高密度地点在玻璃片或硅片或塑料片上等载体上所形成的矩阵。基因芯片杂交一般情况下是将待测的两种样品(主要是RNA样品)分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记,制备成探针与芯片杂交,杂交信号用激光扫描仪检测,计算机分析检测结果,可获得类似与传统的点杂交的杂交数据,以达到快速、高效、高通量及平行性的分析表达谱的目的。本产品为即用型芯片专用的杂交液,可用于各种标记的探针(主要是Cy3和Cy5标记的RNA探针)跟基因芯片的杂交实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、预杂交(下面的操作以载玻片为例)
预杂交的主要作用是在加入标记探针之前从载玻片上洗去未结合的靶基因(靶DNA),同时封闭载玻片表面可能与标记探针进行非特异性结合的反应性基团(如自由*基),从而降低非特异的背景。所有的预杂交、杂交、杂交后洗涤都在Coplin染缸或者显微镜载玻片盘等杂交盒中进行。
1.在室温下,将载玻片浸入装有本产品的杂交盒中(本产品的用量根据杂交盒的大小决定,以能够浸埋载玻片为准)。将杂交盒在42℃水浴中放置30~45分钟,无需震动。
2.在室温下用去离子水清洗载玻片数次。
3.(可选)用100%异丙醇(HPLC级)漂洗载玻片。
4.在加入杂交溶液之前,空气晾干或者通过离心(室温下以2000g离心5分钟,有阵列的一面朝外)干燥载玻片,将干燥后的载玻片立即用于杂交。如果载玻片干燥时间超过1小时,杂交效率可能会迅速下降。
二、杂交
1. 将等同于至少1μg polyA RNA或100μg总RNA的Cy3和Cy5标记的探针RNA混合在一起,最终体积约为6μL。如果没有这么多的,则需要进行RNA扩增。
2. 将6μl标记DNA和30μL本产品在塑料离心管中混合,得到杂交液。
3.(可选)将杂交液在微量离心机中10,000 g离心5分钟,然后将上清液转移到新的塑料离心管中。本步骤以去除靶序列纯化过程中带入的微量玻璃纤维和其他高分子质量的颗粒。
4. 将上清液在100℃下加热2分钟,然后在30℃水浴中冷却30秒。加热混合液可以降低背景。不要将溶液放置在冰上,因为可能会有沉淀析出。
5. 将适量的杂交溶液加到DNA微阵列上,再小心的盖上盖玻片,盖玻片和DNA微阵列之间不能有气泡。
6. 将载玻片置于一个空的移液器吸头盒的上层,下层装5mL自备的3×SSC,盖上盖子即得潮湿的环境。由于杂交是在很小的体积下进行的,在密闭的潮湿保持适当的杂交适度非常重要,过分干燥则盖玻片会粘附在DNA微阵列上,背景会很高;过于潮湿则冷凝的液体会进入盖玻片区域,降低杂交信号。
7.在42℃下将载玻片温育14~16小时。
三、杂交后的清洗
注意在下面的所有操作过程中,一定不要让载玻片干燥。
1.杂交完毕,拆卸杂交盒。如果杂交盒是浸入水浴中的,在松开螺丝之前,仔细擦干水痕,尤其是两个半片盒子之间的水痕。
2.从杂交盒中取出载玻片,浸没于大量的0.5×SSC(含0.01 % SDS)溶液中,直到盖玻片分离。
3. 盖玻片除去后,将载玻片放到玻片夹持器上,然后浸入装有约250mL 0.5×SSC(含0.01 % SDS)溶液的避光容器中。将容器放在轨道振荡器上,并将载玻片振荡2分钟。
4. 将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.5×SSC溶液的容器中,再次将载玻片振荡3分钟。
5. 将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.1×SSC溶液的容器中,再次将载玻片振荡3分钟。
6. 重复上一步2次,每次清洗1分钟。
7.快速(<10秒)将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.01×SSC溶液的容器中,立即将载玻片放到铺有3M Whatman滤纸的离心机微量滴定板夹持器中。低速离心约5分钟迅速干燥玻片。
8. 将载玻片放置在避光的盒子内直到准备扫描。(尽量在当日内进行扫描,因为随着时间的延长信号会降低)
疑难解答:
问题一:高背景(荧光或黑洞)
解决方案:对标记探针进行足够的纯化;清洗过程中操作要迅速,避免载玻片干燥;杂交溶液需要与载玻片基底相匹配。
问题二:没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案:杂交过程中应该连续振荡,不应该有气泡,避免玻片变干;检查RNA的纯化和标记;更换杂交试剂。
GAL指示剂培养基厂商关键词:GAL指示剂培养基,GAL Indicator Medium,BTN130899
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