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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE
- 保质期:
长期
- 英文名:
Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
- 库存:
575
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")动植物总蛋白微量提取试剂盒优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:动植物总蛋白微量提取试剂盒优惠促销
英文名:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit
产地:国产|进口
编号:BTN90707
规格:50次
品牌:百奥莱博
本产品用于快速提取动植物总蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。
产品特点:
1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 5×SDS-PAGE上样液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。
一:匀浆法
注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
二:直接研磨法
注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
三:液氮研磨法
注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。
注意事项:
1.如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀,可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟,以去除可见的小碎片。
2.植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物,如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质,可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇,混匀后-20℃放置1小时或过夜,然后4℃,12000rpm离心10min,弃上清后室温风干,然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后,部分蛋白质可能会发生变性,不能再用于活性检测。
我公司的动植物总蛋白微量提取试剂盒优惠促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·棉蓝乳酚油染色液
编号:BTN150802
英文名称:Lactic Acid Phenol Cotton Blue Staining Solution
规格:250mL
霉菌是形成分枝菌丝的真菌的统称,意即“发霉的真菌”,它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体,但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。霉菌菌丝较粗大、孢子容易在空气中飘散,所以制标本时常用棉蓝乳酚油染色液。
棉蓝乳酚油染色液特点:细胞不变形,具有杀菌,且不易干燥,能保持较长时间,是霉菌菌丝、孢子的形态常分类的重要依据。
储存条件:常温运输,避光保存,有效期一年。
使用方法:
1.涂片:载玻片编号,于载玻片中央滴加2~3滴棉蓝乳酚油染色液。
2.用灭菌接种环或牙签等器具取一小块有颗粒或颜色部分真菌菌落。
3.放入载玻片上的棉蓝乳酚油染色液中,混匀。
4.加盖洁净的盖玻片,轻轻按压制成压片。
5.光学显微镜在低倍、高倍或油镜下观察真菌形态。
6.染色结果:真菌(尤其是烟曲霉菌)中孢子与菌丝是呈蓝色的,背景为淡蓝色。待检细菌培养时间会影响染色,菌落培养时间过长或已死亡或细菌溶解,染色结果都常呈阴性反应。
动植物总蛋白微量提取试剂盒优惠促销关键词:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit,动植物总蛋白微量提取试剂盒,BTN90707
·特异性显色基质鲎试剂盒
编号:BTN170401
规格:32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C 因子,引起一系列酶促反应,激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的显色基质,使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA,λmax=405nm)。在一定时间内,pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关,据此,可以定量样品的内毒素浓度。同时,对硝基*(代"*")胺(pNA)也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色(λmax = 545nm),避免了样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。特异性鲎试剂是在鲎试剂的配方中添加G因子旁路抑制剂,使鲎试剂对(1,3)β-D-葡聚糖产生假阳性反应,使检测结果更加准确可靠。本鲎试剂对细菌内毒素的反应是特异的,抗干扰能力比普通鲎试剂更强,使用时只需用细菌内毒素检查用水直接溶解即可,不需另外添加G因子抑制剂(抗增液)。
试剂盒特点:
1. 仅用于体外细菌内毒素的定量检测,严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。实验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。
3. 待测样品的pH值应在6.0–8.0之间,若超出此范围,需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M 盐*(代"酸")调节。
4. 当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时,须进行干扰实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 细菌内毒素标准品 | 2支 |
| 特异性鲎试剂 | 2 支×1.7mL |
| 显色基质 | 2 支×1.7mL |
| 偶氮化试剂1 | 2 支×10mL |
| 偶氮化试剂2 | 2 支×10mL |
| 偶氮化试剂3 | 2 支×10mL |
| HCl(反应终止剂) | 50ml |
| 细菌内毒素检查用水 | 50mL×2 瓶 |
| 除热原试管,10×75mm | 10×5 支 |
| 除热原吸头,1000VL | 10×4 支 |
| 除热原吸头,200VL | 1盒 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期两年。
动植物总蛋白微量提取试剂盒优惠促销关键词:Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit,动植物总蛋白微量提取试剂盒,BTN90707
·二*异香豆素溶液(10mg/mL)
编号:BTN130540
英文名称:Dichloroisocoumarin Solution
规格:5mL
本产品为10mg/mL的DMF溶液,工作浓度为1-43μg/mL。二*异香豆素(3,4-Dichloro-2-benzopyran-1-one;3,4-DCI),分子量是215.0,溶于DMF。它可以抑制大部分丝*酸蛋白,如,弹性蛋白酶,组织蛋白酶G,胞内蛋白酶Glu-C等,不能抑制木瓜蛋白酶、β-内酰胺酶和白*酸*基肽酶。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期三个月。
·核酸稀释液,测OD专用
编号:BTN131179
英文名称:Diluent for NA OD Detection
规格:250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·酪蛋白溶液(TBS)
编号:BTN131105A
英文名称:Casein Blocking Solution(TBS)
规格:250mL
即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
A型:溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。
B型:溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白,Kathon防腐剂,pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号:BTN140431
英文名称:E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定复制,还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。
菌株基因型:Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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