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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 保质期:
一年
- 英文名:
Western blotting(Mouse IgG)
- 库存:
307
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)批发,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)批发
产地:国产|进口
编号:QN1158
品牌:百奥莱博
规格:1盒
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠IgG二抗——————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
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·6×DNA上样缓冲液
编号:QN1028
英文名称:DNA Loading Buffer,6×
规格:5ml|100ml
本产品是6倍浓缩的DNA上样缓冲液,用于DNA凝胶电泳,能促使DNA样品沉入凝胶加样孔中。其主要成份为甘油,EDTA,*酚蓝和二甲*青等。*酚蓝和二甲*青用作电泳时的指示剂,可指示电泳进程。
使用方法:
1、请按每5微升DNA样品加入1微升6×DNA Loading Buffer上的比例(6倍稀释)来使用。
2、混匀后,直接加到DNA凝胶加样孔中,电泳。
储存条件:4℃,有效期至少12个月。
·纳他霉素
编号:QN0075
英文名称:Pimaricin
规格:1g
本品是一种抗真菌的多烯类抗生素,靠特异性地结合麦角甾醇,抑制真菌生长。 不像制霉菌素和菲律宾霉素, 纳他霉素不改变细胞膜的通透性。
CAS:7681-93-8
分子式:C33H47NO13
分子量:665.73
储存条件:2~8℃
纯度:≥95% (HPLC)
物理性质:几乎无臭无味,可含3mol的水,几乎不溶于水,高级醇、醚、酯,微溶于甲醇,溶于冰醋酸和二甲*亚 砜。对氧化剂和紫外线较为敏感。
·水溶性淀粉
编号:QN0179
英文名称:Soluble Starch
规格:100g|500g
本品常用于测定麦芽淀粉酶糖化活力,碘量滴定分析法指示剂,血液非蛋白氮的检验,滴定血清*等生化研究方面。
别名:淀粉糊精
CAS号:9005-84-9
分子式:(C12H22O11)n
分子量:(342.30)n
储存条件:室温干燥保存
性状:白色或淡黄色粉末
·马心细胞色素C
编号:QN0324
英文名称:Cytochromes C
规格:25mg
细胞色素C主要被认为是一种电子负载线粒体蛋白质。在凋亡通路已被确定为一个重要的中介。
CAS号:9007-43-6
纯度:≥95%(SDS-PAGE)
储存条件:−20℃
北京现货ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)批发关键词:Western blotting(Mouse IgG),QN1158,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)
F030632 FITC标记小鼠抗猪IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Pig IgG*FITC
F060101 艾滋抗原
乙二醇双(2-*基乙基)四乙酸 N-Acetyl-L-Valine 67-42-5
CYB168011 猪血清 500ml/瓶
或
丙*(代"酮")酸 AIBI 127-17-3
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