脱氧核糖核酸酶Ⅰ 酶和辅酶

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脱氧核糖核酸酶Ⅰ 酶和辅酶
编号：QN0500
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
DNase I催化脱氧核糖核酸降解，可用于蛋白或RNA的提取中去除DNA。

酶反应：脱氧核糖核酸→二核苷酸-5’-磷酸＋寡聚核苷酸-5’-磷酸

CAS号：9003-98-9
分子量：约31 kDa
储存条件：-20℃
酶活：1500 units/mg
性状：类白色冻干粉

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脱氧核糖核酸酶Ⅰ 酶和辅酶关键词：9003-98-9,脱氧核糖核酸酶Ⅰ,DNase I


·盐*(代"酸")多巴胺
编号：QN0617
英文名称：Dopamine hydrochloride
规格：5g
本品是一种生化试剂，仅用于科研领域。

别名：3-羟基酷胺盐*(代"酸")盐;3-羟酪胺;多巴胺盐*(代"酸")盐
CAS号：62-31-7
分子式：C8H12ClNO2
分子量：189.64
纯度：＞98%
性状：白色针状结晶或结晶性粉末
储存条件：-20℃

·亲和素
编号：QN0732
英文名称：Avidin
规格：1mg
亲和素是由4个分子量为16kDa的亚单位组成的糖蛋白，每单位可结合1ug的生物素(Biotin)，用于生物素-亲和素-免疫印迹技术。

CAS号：1405-69-2
纯度：＞95.0%蛋白质
性状：白色粉末
溶解性：溶于0.1M磷酸盐缓冲液pH6.8，参考浓度1mg/ml
活性：＞10U/mg
储存条件：−20℃

·潮霉素B
编号：QN0023
英文名称：Hygromycin B
规格：1g
本品常用做蛋白质合成抑制剂，可用于植物细胞培养等生化研究。本品是潮霉素B干粉，用于细胞培养实验溶解后过滤除菌。推荐溶剂水，PBS溶液。

CAS：31282-04-9
储存条件：-20℃
别名：湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉
效价：≥950U/mg

潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳动物真核细胞。

大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418，Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

使用方法

1. 常用筛选浓度
注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1)第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2)根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

终浓度(μg/mL)	培养基体积(ml)	5mg/ml潮霉素B加入体积(ml)
50	9.9	0.1
100	9.8	0.2
250	9.5	0.5
500	9.0	1.0
750	8.5	1.5
1000	8.0	2.0

3)第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。

注意事项：
1)潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了来自大肠杆菌之外，还发现于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2)本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作。
3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


脱氧核糖核酸酶Ⅰ 酶和辅酶关键词：9003-98-9,脱氧核糖核酸酶Ⅰ,DNase I
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·6-苄基*基喋呤 6-BA
编号：QN0241
英文名称：6-Benzylaminopurine
规格：1g|5g|25g
本品6-苄基*基喋主要用于植物细胞分裂因子;合成细胞激动素;植物组织细胞培养。

6-苄*基嘌呤(6-Benzylamino Purine, 6-BAP)，一种合成的细胞分裂素，可与植物生长素一起使用增强植物生长发育反应，促使植物开花或者节点发芽，刺激细胞分裂以使得果肉肥厚，降低花落或果实脱落的几率，提高绿色蔬菜的采后存活周期，促进植物细胞延伸和分裂，加强萌发种子生长能力，增强植物对外界应激如干旱，高盐，严寒等的免疫性，并改善植物自身应对疾病的能力。6-苄*基嘌呤常用作植物生长培养基(如Murashige and Skoog, Gamborg’s, 和Chu’s N6)的一种重要组分以提高产量。

注意事项:
(1)用于细胞实验，溶解后，须用一次性针头滤器过滤除菌。
(2)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

别名：6-苄基腺嘌呤;N-苄基腺苷;Benzyladenine;6-BA;N6-Benzyladenine
CAS号：1214-39-7
分子式：C12H11N5
分子量：225.25
储存条件：阴凉干燥保存
纯度：≥99.0% (HPLC)
性状：白色结晶粉末
溶解性：溶于冰乙酸，参考浓度50mg/ml。



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