胰蛋白酶工作液(水剂、中度消化)

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

，Rb，TopoismeraseⅡ 等。 2、酶消化方法 常用 0.1% 胰蛋白酶和 0.4% 胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至 37℃，切片也预热至 37℃，消化时间约为 5~30 分钟（胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从 0.05% 至 0.25% ）； 胃蛋白酶消化37℃ 时间为 30 分钟。皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin 溶液，消化时间为室温孵育 30 分钟。 适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen

「体温低」竟能更长寿！Nature Aging 研究揭示低温延寿的关键机制

状况的发生。但低温与蛋白酶体以及寿命延长三者之间的关系却知之甚少。   鉴于秀丽隐杆线虫发育后暴露于低温足以诱导寿命延长，研究人员试图探索低温是否会影响成年期蛋白酶体的活性。结果发现，与对照组相比，在低温下，秀丽隐杆线虫的胰蛋白酶样蛋白酶体活性显著增加。   为了评估低温是否会改变蛋白酶体亚基的水平，他们使用了现有的定量蛋白质组学数据，但并没有发现在低温和标准温度下秀丽隐杆线虫 20S 亚基的显著差异。此外，蛋白质组学分析也未检测到 19S 亚基的显著变化。   在 PA28 亚基中，线虫表达

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

一次。 吸出混合物的液体部分。加入 800 μl 的 1 × SDS 胶加样缓冲液到球珠中，煮沸 4 min。 将样品加入到大孔的不连续 SDS-PAGE 梯度胶中，在 10 mA 的恒定电流下电泳过夜。 通过考马斯蓝染色观察蛋白质泳带。 从胶上切下目标带，将其放到微量离心管中，用 1 ml 50% 乙腈洗两次，每次 3 min。 用胰蛋白酶消化胶中的蛋白质，再将肽电洗脱。 通过窄孔高效液相色谱分离肽。将收集的肽在 ABI 477A 或 494A 机器上进行自动 Edman