胃蛋白酶工作液(水剂、强度消化)

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

，Rb，TopoismeraseⅡ 等。 2、酶消化方法 常用 0.1% 胰蛋白酶和 0.4% 胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前预热至 37℃，切片也预热至 37℃，消化时间约为 5~30 分钟（胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从 0.05% 至 0.25% ）； 胃蛋白酶消化37℃ 时间为 30 分钟。皂素（Saponin）：一般使用浓度为2~10mg/ml的saponin 溶液，消化时间为室温孵育 30 分钟。 适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

在使用前现加，其他抑制剂成分可以在水溶液中稳定 5 天。 二、各种成分在工作液中的终浓度 Tris-HCl：50 mM，pH 7.4 NP-40：1% 去氧胆酸钠：0.25% NaCl：150 mM EDTA：1 mM PMSF：1 mM 抑蛋白酶肽，亮抑酶肽，胃蛋白酶抑制剂：各 1 μg/ml Na3VO4：1 mM NaF：1 mM 三、实验步骤 转染后 24～48 h 可收

免疫组化技术要点

较好。2. 组织脱水、透明时间不能太长，否则在切片时容易碎片，切不完整。3. 切片时展片有些组织在切片后难以在水中展开，这时可适当地在水中加入几滴乙醇。4. 烤片60℃ 30分钟或37℃ 过夜，温度太高或时间太长，抗原容易丢失。5. 蜡块及切片的保存最好在4℃保存6. 脱片问题Poly-L-Lysine(多聚赖氨酸)为目前免疫组化染色工作中最常用的一种防脱片剂，6ml的多聚赖氨酸溶液可按1:10稀释成60ml的工作液，适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如不行，可用双重处理（APES