超级杂交液(Oligo探针)厂家直销

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名称：超级杂交液(Oligo探针)厂家直销
英文名：Super hybrid solution(Oligo probe)
产地：国产|进口
规格：10mL
本产品为即用型Oligo探针专用核酸杂交液。核酸杂交一般是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交，由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子(靶分子)。核酸杂交是分子生物学的基本技术之一，应用非常广泛。

产品特点：
1. 既可以用于DNA Oligo探针，也可以用于RNA Oligo探针。
2. 即开即用，使用方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 对 Oligo探针的杂交，Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。
2. 对 Oligo探针的杂交，最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo 较短，更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等)，所以最佳温度需要适度摸索和优化。
3. 确定洗膜温度: Oligo探针可以室温洗膜。
4. 预杂交步骤
预杂交就是用不含Oligo探针的本产品跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附Oligo探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附Oligo探针，造成高背景。
1)将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
2)将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口)，按每平方厘米印迹膜加0.2mL本产品的比例沿小口加入本产品，然后用塑料封口机将口封牢。
3)将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1-2小时，延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使本产品与印迹膜充分接触。
5. 杂交步骤
1)将Oligo探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口，加入Oligo探针后用热封机封口)。Oligo探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，Oligo探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则Oligo探针的量可减少。如果是放射性Oligo探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
2)在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6-12小时。
6. 洗膜步骤
注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。
此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的Oligo探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低，热稳定性较差，在一定的温度和较低的离子强度下，即可洗掉。
1)杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含Oligo探针的杂交液。此含Oligo探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2)剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。
3)重复上步操作一次。
4)将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5)重复上步操作一次。
6)将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。

疑难解答：
问题一：高背景(有或没有杂交信号)
解决方案：将放射性Oligo探针的比活降低到2×10E6 cpm/mL以下；将非放射性Oligo探针的终浓度降低到30 ng/mL以下；减少杂交时间；适当提高杂交温度。
问题二：没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案：杂交过程中应该连续振荡，不应该有气泡，避免印迹膜变干。将放射性Oligo探针活性提高到>5×10E8 cpm/ng，提高非放射性标记Oligo探针的终浓度；适当降低杂交温度。

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·3mL亲和层析柱
编号：BTN140650
英文名称：Affinity Chromatography Colum(3mL)
规格：3mL
本产品适用范围广泛，可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子；还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等)，通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。

亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法，其示意图如下：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

常用亲和标签及纯化方案：



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·96孔板病毒DNA提取试剂盒(真空法)
编号：BTN131197
英文名称：Virus DNA extraction kit(96-well plates)(Vacuum method)
规格：1次

·AEBSF溶液(10mg/mL)
编号：BTN130544
英文名称：AEBSF Solution
规格：5mL
本产品为浓度是10mg/mL的AEBSF水溶液，工作浓度为0.1-1.0mg/mL。4-(2-*乙基)*磺酰*盐*(代"酸")盐(4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride，Pefabloc SC)，分子量是239.5，溶于水，无毒，在低pH条件下，比PMSF更稳定。它是一种水溶性的不可逆的丝*酸蛋白酶，可以抑制胰凝乳蛋白酶，激肽释放酶，血纤维蛋白溶酶，凝血酶和胰蛋白酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期3个月。

·硫*(代"酸")新霉素干粉
编号：BTN60203
英文名称：Neomycin Sulfate Powder
规格：1g
本品为白色或类白色的粉末，极易引湿，水溶液显右旋光性。在水中极易溶解，在乙醇、乙*(代"醚")、丙*(代"酮")或*仿中几乎不溶，有毒。

作用原理：通过结合于70S核糖体亚基阻碍蛋白质合成。高浓度的新霉素可导致真菌细胞毒作用，这是由于它和真核线粒体核糖体(与原核核糖体相似)相互作用，与真核核糖体低亲和力。

抗性机制：抗性基因aph 来于Tn5，编码*基糖苷磷酸转移酶元，它使硫*(代"酸")新霉素失活。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

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