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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNase-Free DNase Solution
- 库存:
399
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京无RNase的DNase溶液厂商,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京无RNase的DNase溶液厂商
英文名:RNase-Free DNase Solution
产地:国产|进口
编号:BTN90903
品牌:百奥莱博
本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase,专门用于降解RNA样品中的DNA污染。
产品特点:
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
3. 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
4.反应条件经过优化,可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA,也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
5.可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 300μl |
| 10×DNase Buffer | 300μl |
| 50mM EDTA溶液 | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在一无RNA酶的离心管中配制50μl的反应液:
| 成分 | 用量 |
| RNA样品 | 1μg |
| 10×DNase Buffer | 1μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 1μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(可不加) |
| 补超纯水到 | 10μL |
2. 混匀,短暂离心,37℃放置30分钟;
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp
试剂盒进行柱式纯化,回收RNA。
4.电泳检测是否去除了基因组 DNA,然后进行后续实验。
二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含 RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在柱式法提取过程中,完成洗涤步骤。
2. 配制 50μl DNase工作液。
| 成分 | 用量 |
| 10×DNase Buffer | 5μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 10μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(也可不加) |
| 补超纯水到 | 50μL |
3. 加在离心吸附柱中间,室温放置5-30分钟。
4. 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
5. 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。
三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按2 U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。注意:酶的最佳用量也许需要优化。
2. 37℃放置15分钟。
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟;此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化,回收RNA。
四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按下表设置切口平移标记反应:
| 成分 | 用量 |
| 10×DNA聚合酶I缓冲液 | 2.5μl |
| 3 dNTP mixture,1mM each | 1.25μl |
| 标记核苷酸:非标记核苷酸混合(3:7,1mM) | 1μl |
| RNase-free DNase(0.002U/μL,见注) | 1μl |
| DNA聚合酶 I(10U/μL) | 0.5-1.5μl |
| 模板 DNA | 0.25μg |
| 加水到 | 25μl |
注:稀释 RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶 I缓冲液:50mM
2. 15℃放置 15-60分钟。
3. 加入10μl 50mM EDTA溶液。
4. 65℃放置 15分钟灭活酶。
5. 所得探针可以纯化后使用,也可以直接使用。
欲咨询购买北京无RNase的DNase溶液厂商,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·柱式病毒DNA提取试剂盒
编号:BTN70701
英文名称:Virus DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。
试剂盒特点:
1. 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒,不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液3.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对于液体病毒样品:在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟,移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中,用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到第一步得到的0.2mL样品中,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000 rmp室温离心1分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0,然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
疑难解答:
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA 有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝对量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR 检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。
北京无RNase的DNase溶液厂商关键词:无RNase的DNase溶液,BTN90903,RNase-Free DNase Solution
ARB11810 人鼻病毒IgM(RhV-IgM)elisa测定使用说明书
BL1343 PH值标准液(PH6.86)
二**(代"胺")盐*(代"酸")盐 L-Alaninamide hydrochloride 587-84-8
BTN100919 消解酶(溶细胞酶)干粉 Zymolase Powder
F030840 BIOTIN标记兔抗驴IgG抗体 Polyclonal Rabbit Anti-Donkey IgG*BIOTIN
SJ0738 大鼠中性粒细胞分离液
ARB10260 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA代测服务 Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polyPeptide b4,ugt2b4 ELISA KIT
ARB11797 人碱性磷酸酶(ALP)酶联免疫定量检测 Human alkaline phosphatase,alp ELISA KIT
ARB14149 大鼠糖基化终末产物(AGE)含量检测
高范围RNA Ladder Uniconazole
003006 小鼠血浆 100ml|500ml
BL1342 PH值标准液(PH4.01)
PY04-057 *霉素 1g/支×10支 根据要求适量添加 抑菌剂
9067-32-7 Sodium Hyaluronate 透明质酸*
ARB12533 大鼠透明质酸(HA)Elisa方法检测 Rat hyaluronic acid,ha ELISA KIT
A5106-25 绵羊血清 100ml|500ml
SJ0847 豚鼠血清
002005 草酸*抗凝羊血
北京无RNase的DNase溶液厂商关键词:无RNase的DNase溶液,BTN90903,RNase-Free DNase Solution
·预染蛋白Marker(43~200kD)
编号:BTN70704B
英文名称:Prestained Protein Marker(43-200kD)
规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
| 预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
| 分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 | |
| 肌球蛋白重链 | 200kD | 有 | |
| *调素结合蛋白 | 130kD | 有 | |
| 兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
| 牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
| 兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
| 牛碳酸酐酶 | 31kD | 有 | |
| 人生长激素 | 22kD | 有 | |
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1kD | ||
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
动物组织总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP431) ——动物组织
以下操作按照天根产品 DP431 动物组织总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 动物组织(50-100 mg)2. 无水乙醇 ,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I 配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml);1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 研磨器 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
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