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细胞名称:NCI-BL2009 人淋巴母细胞
组织来源:淋巴
培养条件:1640 +10% FBS;37℃,5% CO2
形 态:悬浮;上皮细胞样
PubMed=31803961; DOI=10.1002/jcb.29564
Mulshine J.L., Ujhazy P., Antman M., Burgess C.M., Kuzmin I.A., Bunn P.A. Jr., Johnson B.E., Roth J.A., Pass H.I., Ross S.M., Aldige C.R., Wistuba I.I., Minna J.D.
From clinical specimens to human cancer preclinical models -- a journey the NCI-cell line database-25 years later.
J. Cell. Biochem. 121:3986-3999(2020)
PubMed=31978347; DOI=10.1016/j.cell.2019.12.023
Nusinow D.P., Szpyt J., Ghandi M., Rose C.M., McDonald E.R. III, Kalocsay M., Jane-Valbuena J., Gelfand E.T., Schweppe D.K., Jedrychowski M.P., Golji J., Porter D.A., Rejtar T., Wang Y.K., Kryukov G.V., Stegmeier F., Erickson B.K., Garraway L.A., Sellers W.R., Gygi S.P.
Quantitative proteomics of the Cancer Cell Line Encyclopedia.
Cell 180:387-402.e16(2020)
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l、4ml肝素抗凝血于离心管中,加入2ml RPMI 1640。 2、混匀后沿管壁缓慢加到预置有4ml淋巴细胞分离液的液面上静置30min。 3、1500rpm,15min,吸取白细胞层(第二层)于另一离心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗涤白细胞两次。 5、将白细胞接种至1ml RPMI 1640培养基中,加入10μl环胞霉素和100μl的EBV(EB病毒)液,混匀。 6、水浴摇床,40次/分,37℃,3hr。 7、1500rpm,15min。将细胞
淋巴母细胞转形 blastoid transformation
亦称淋巴细胞的母细胞化。小淋巴细胞一遇到致敏性抗原,体积便增大成为大淋巴细胞,胞质嗜碱性增强,有时产生液泡。核亦增大,同时变成不规则的圆形,染色质显示微细的网状构造,可见到多个核仁,进行分裂增殖。淋巴细胞的母细胞化,可认为是与细胞免疫有关联的现象,在非特异性体外培养也得知有引起母细胞化的物质,植物凝血素(PHA)通常作细胞分裂促进剂( mitogen)使用,基于淋巴细胞的母细胞转化率,可应用于淋巴细胞免疫机能的测定。已知淋巴细胞对植物凝血素促母细胞化反应低落的疾病有:淋巴
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞
2. 纯化淋巴母细胞和除去死细胞:分别叠加50%和30%Percoll液。收取经PHA(或其它抗原 、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异型的PBMC(如肾综合征出血热患者),按要求装样、离心和取样。位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞;两层Percoll之间为淋巴母细胞,纯度和回收率在80%以上,位于30%Percoll表面是死细胞。收获淋巴母细胞可进行表型、结构以及功能的研究。 (四) 人不同血细胞的漂浮密度 表 人不同血细胞的漂浮
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