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大量库存
- 细胞类型:
肿瘤细胞/正常细胞
- 组织来源:
详见说明书
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详询
- 物种来源:
人源
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 器官来源:
详询客服人员
- 运输方式:
快递运输
- 年限:
长期保持
- 生长状态:
良好
组织来源:直肠;结直肠腺癌
培养条件:DMEM高糖+10% FBS
形 态:贴壁;上皮细胞样
背 景:SW480源自原位直肠腺癌, CSAp和直肠抗体阴性。p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代,309位密码子的C→T突变导致Pro→Ser替代。细胞p53蛋白表达水平提高。癌基因c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis 和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。不表达细胞溶解酶,一种与肿瘤入侵相关的金属蛋白酶。有报道称该细胞表达GM-CSF。 ras 原癌基因的12位密码子有一个突变,可以用作PCR法检测该突变的阳性对照。
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数细胞培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验「外泌体 + 环状 RNA」国自然双热点助力肿瘤研究发表高分文章
的外泌体能促进 CRC 的增殖、迁移和侵袭 作者从两种 CRC 细胞系(HCT116和SW480)上清中分别分离获得外泌体,经过透射电镜、NTA 和 WB 鉴定后,确认已分离出外泌体。随后,作者用外泌体处理对应的 CRC 细胞,发现外泌体能显著促进 CRC 细胞增殖、迁移和侵袭,并减少凋亡。 WB 结果也显示,外泌体能提升 CRC 细胞中 BCL-2、 N-cadherin、Vimentin、MMP9 蛋白水平,和降低 E-cadherin、Cleaved-caspase3、Cleaved
感激。。。 fangweibin119 蛋白定量后上样量一致吗? 内参做了没有? 一顿饭 一你可以搜索本版内有关p-ERK WB的相关帖子,相信你会找到不少可以提高阳性率的注意事项; 二是我没有用过hela系细胞株。但如果你找得到SW480(结肠癌)细胞株,是一个非常好的阳性对照,一秒钟曝光,条带强得一塌糊涂....... 祝好运! bigrabbit 不知道你是如何处理
。4. 比色:选择 490 nm 波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果。个人心得体会1. 细胞消化、接种数量:注意消化和数量,消化和数量,消化和数量(重要的事情说三遍)。从我个人的实验经验来看,这是重中之重。若消化出现问题,则会影响细胞的活性,进而影响 OD 值。对于 MDA-MB-231、MCF-7、HS-578T 等一系列容易消化的细胞,消化时胰蛋白酶中不添加 EDTA,消化时也仅需胰酶浸润数秒即可。然而,对于 SW480 等一系列难以消化的细胞,胰蛋白酶中需添加浓度为 0.25
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