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- 2025年07月13日
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- 技术资料
- 库存：
T25培养瓶，1×106cells
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
见说明书
- 细胞类型：
见说明书
- ATCC Number：
见说明书
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
人
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
淋巴细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
见说明书
- 器官来源：
见说明书
- 运输方式：
常温运输或干冰运输
- 年限：
长久
- 生长状态：
悬浮
- 规格：
T25培养瓶，1×106cells
细胞名称：人自然杀伤细胞；NK92
规格：T25培养瓶，1×106cells
形态特征：淋巴细胞样
生长特性：悬浮
描述
特征特性：NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性；铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征：CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性，CD56亮；CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34和HLA-DR阴性。PCR检测细胞存在EBV的DNA序列。
培养条件：Alpha MEM 胎牛12.5% 马血清12.5% 0.2mM肌醇，0.1mM巯基乙醇，0.02mM叶酸，100-200U/ml IL-2
传代方法：初始细胞密度2-3×105活细胞/mL，可以通过添加或更换培养基维持细胞。细胞对过度生长或养分枯竭极度敏感。根据细胞密度每2-3天换液。
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶特点：细胞代数为2-3代
包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
NK-92细胞售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员，我们将尽快为您解决。
NK-92细胞培养需要注意哪些问题
其实，刚刚复苏的细胞就像是刚刚出生的baby，非常脆弱，需要各位小伙伴的细心呵护，不然，细胞就会被我们花样玩死。为了避免细胞不明不白的挂掉，我们就要对细胞的各种习性了如指掌。1. 俗语道，到什么山上唱什么歌，不同细胞用不同的培养液。此时，就不得不提起培养基里的“四大金刚”—MEM、DMEM、1640、F-12，它们基本参与了90%以上种类细胞的培养过程。MEM能力非常全面，号称是应用最广泛的细胞培养液。DMEM作浓度要高出2~4倍，可分为高糖型（含葡萄糖4500mg/L）和低糖型（含葡萄糖1000mg/L）。1640营养成分比较简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，常用于淋巴细胞的培养。F12常用来支持CHO、Hela和L－细胞生长以及原代大鼠肝细胞和前列腺上皮细胞的培养。MEM和F12这两种培养基各取1/2，即可形成神经生物学最通用的培养基。在此，奉送一个不同细胞系对应的不同培养液的图，供大家参考。
| 细胞名称 | 细胞类型 | 物种 | 来源组织 | 培养液与血清 |
| 293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM,10%马血清 |
| 3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| A549 | 上皮样 | 人 | 肺癌 | F-12K,10%FBS |
| A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM，10%FBS |
| AtT-20 | 上皮样 | 小鼠 | 肿瘤 | F-10，15%马血清+2.5%FBS |
| BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM，10%FBS |
| BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | DMEM，10%FBS or MEM,10%FBS and NEAA |
| BHL-100 | 上皮样 | 人 | 乳腺 | McCoy,sA,10%FBS |
| BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲细胞 | MEM,10%FBS and NEAA |
| Caco-2 | 上皮样 | 人 | 结肠腺瘤 | MEM,20%FBS and NEAA |
| Chang | 上皮样 | 人 | 肝 | BEM，,10%牛血清 |
3. 当培养的贴壁细胞形态不好时，可在传代时，先倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清都可以）洗涤一次，用滴管吸走，再加入3ml培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次，把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况（10min，20min，30min）。而后迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次，然后加入完全培养基培养并观察细胞生长情况以及形态。直至找到细胞完美的形态为止。
4. 至于在培养瓶中加入多少培养基量，则是需要实验汪们自己去摸索的。对于生长快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基，细胞形态会更好，但是要注意对换液时间的把握。
5. 如何选择培养瓶。一般，生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好；生长速度快的细胞，用玻璃瓶培养的效果会更好。因此，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候（比如细胞刚复苏时或者原代培养），塑料瓶会好一点；而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
6. 细胞冻存时，盖子要拧紧，不然复苏水浴时会渗水，造成细胞污染。因而冻存管要选择原配的管子和盖子（不同牌子、型号的管子会有差别），盖子拧紧后最好用封口膜封住。且每支冻存管都要标上细胞的名称、冻存时间，并记录在册，以免后续复苏细胞时，取错细胞。
7. 细胞冻存时要严格进行梯度降温（-4℃→-20℃~-40℃→-80℃→液氮）。要知道冰火两重天的生活环境只会让娇弱的细胞自爆身亡，谨记：缓降温！但如果真心赶时间时，可以使用细胞冻存盒进行细胞冻存，而后尽快将其转入液氮中。此外，要定期测量液氮罐里的液氮储备，以保证细胞全部浸在液面下。
8. 细胞解冻时，由于冻存管管壁较厚、隔热，而导致水浴时间太长（2min还没融化）时，可以将水浴锅的温度调至40℃左右，可以缩短解冻时间。
9. 提前预定超净台，减少复苏后插在冰盒里等待的时间，可避免细胞房人满为患，超净台使用紧张，复苏1h后，还没有加入新的培养液。（高浓度DMSO防止胞内形成冰晶，冻存时保护细胞，但复苏融解后，浸泡时间太久会对细胞有毒性）10. 复苏细胞时一定要有耐心，因为有些细胞在复苏一星期后才会真正有起色。因而，尽管细胞在复苏三四天后没有任何动静，也不要轻易倒掉所有细胞，要耐心等待，两周后再做决定。
11. 有关DMSO的一些注意事项：(1) DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内的离子浓度、减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤程度。(2) DMSO在溶解过程中会放热，应先与培养基混匀后再加血清，同时冻存液最好提前配置，DMSO现配对细胞的毒性可能更大；(3) 复苏时，要离心去除DMSO，并用新鲜的培养基洗涤1-2次，注意离心的时候速度不要太快。
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文献和实验NK细胞又称为自然杀伤细胞，属于大颗粒淋巴细胞，来源于骨髓，占外周血淋巴细胞的5%~15%，是重要的免疫细胞。科学家在1975年首次鉴定到了NK细胞，这类细胞能够在缺少T、B细胞的情况下直接杀伤肿瘤细胞。与具有细胞毒性的CD8+T细胞不同，NK细胞杀伤肿瘤细胞时不需要预先致敏可以直接杀伤MHC阴性的肿瘤细胞，这使得NK细胞在过继细胞免疫治疗中被广泛应用。但NK细胞在外周血淋巴细胞中所占的比例较低，所以有必要建立一种NK细胞体外扩增技术，用于研究NK细胞的功能并为肿瘤的细胞免疫治疗奠定
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Nature：癌症疫苗新突破！调动 T 细胞与 NK 细胞的双重攻击，全面杀灭癌细胞
组织相容性复合体（MHC），然而 MHC 在个体之间的异质性较大，因此需要精准、个性化的癌症疫苗。此外，肿瘤也经常通过干扰肽递呈的机制来逃脱 T 细胞介导的免疫杀伤作用。 前期的研究结果表明，通过膜结合的 MICA 和 MICB（MICA/B）激活 NKG2D 受体能够触发自然杀伤细胞（NK）的细胞毒性程序和 CD8+ T 细胞的共刺激信号转导。然而，许多人类肿瘤通过细胞表面 MICA/B 的蛋白水解而逃避这一重要的免疫识别途径。 2022 年 5 月 25 日，来自美国波士顿 Dana-Farber 癌
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