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强力溴化乙锭去除剂优惠

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  • ¥170 - 2160
  • 百奥莱博
  • 北京
  • SY0248-OGK
  • 2025年07月05日
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    • 英文名

      EB Eraser

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      621

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括强力*化乙锭去除剂优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:强力*化乙锭去除剂优惠
    英文名:EB Eraser
    规格:50T
    编号:SY0248
    品牌:百奥莱博
    强力 EB 去除剂是专用于清除*化乙锭(EB)污染的产品,通过与EB分子中的*基反应和断开EB分子中的含氮杂环而有效破坏EB的分子结构,清除EB的致癌性,从而实现清洁EB污染的目的。本产品可以消除EB的荧光,并使其致突变性降低99.5%以上。

    适用范围广泛,可用于清除电泳缓冲液、生化溶液和固体表面的EB污染(如实验台、离心机、玻璃器皿、不锈钢制品等)。

    使用简单、方便,使用强力EB去除剂将EB污染物处理后,再丢弃可以保护环境不受EB污染物影响。

    注意事项

    1) 溶液 A 有腐蚀性,并且操作EB 过程中为保护您的安全,请戴手套和眼罩操作。
    2) 本产品暴露于空气中的时间不宜过长,使用完毕请立即密封保存于避光通风处。
    3) 化学试剂配制和处理 EB 过程中可能有微量刺激有害气体产生,请在通风橱中操作。
    4) 没有一种方法可以100%消除EB,因此即使处理后,应该戴手套小心操作,而不应该视为100%安全。有条件者,最好定期检测突变性,确保处理过程的正确。

    操作步骤

    一、各种污染溶液处理(100mL EB 污染溶液)

    1.确保各种污染溶液中 EB 浓度不超过0.5mg/mL,如果浓度过高,先用水稀释到符合要求的浓度。
    2.工作液准备:在通风橱,用去离子水将 2mL溶液A稀释到终体积20mL备用,将0.42g去毒剂B溶于水并定容到12mL备用。
    3.将上述 20mL溶液A工作液和12mL去毒剂B工作液加入到100mL EB污染溶液中,仔细搅拌混匀(确保 pH≤3)。
    4.室温放置反应 24 小时,用碳酸**调节pH 到5-9。
    5.用大量水将反应物冲入水槽废弃。

    二、各种固体表面污染处理

    1.工作液准备:在通风橱,在300mL去离子水中加入4.2g去毒剂B,充分溶解后加入20mL溶液A,仔细搅拌混匀(pH 大约为1.8)。
    2.确保电器都处于断电状态后,用纸巾浸泡刚准备好的工作液,仔细将污染表面擦拭干净,重复6次,每次换用新的浸泡了工作液的纸巾,最后用浸泡了干净去离子水的纸巾擦拭干净工作液,收集纸巾到一个指定处理用容器中。工作液pH 值为1.8,有轻微腐蚀性,不宜用来擦拭耐受力弱的物品,可改用去离子水浸泡的纸巾擦拭。擦拭前可用紫外灯帮助发现污染区,擦拭后帮助确认已经擦拭干净。
    3.将这些污染纸巾浸泡在工作液中至少室温放置一个小时,用碳酸**调节pH到5-9后,液体用大量水冲入水槽,纸巾入垃圾堆。

    运输与保存方法:冰袋运输。溶液A于-20℃保存,去除剂B于4℃保存。12个月内有效。

    想要了解更多关于强力*化乙锭去除剂优惠的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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    强力*化乙锭去除剂优惠关键词:强力*化乙锭去除剂,SY0248,EB Eraser


    ·His标签蛋白纯化预装柱
    编号:SY0394
    英文名称:Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 5ML
    规格:5ml|1ml
    Ni-NTA Agarose Resin 6FF以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联四配位的氮川三乙酸(NTA)为配体,螯合镍离子(Ni2+)后,形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构可保护镍离子免受小分子的进攻,更加稳定,可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件。此外,因其基质的耐压性(该基质可以耐受最高0.3 MPa的压力),该产品可以用于工业大规模蛋白的纯化,可在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化。

    Ni-NTA 6FF Chromatography Column是一种以Ni-NTA Agarose Resin 6FF为填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户用于纯化His-tag蛋白。

    基质(Matrix):高度交联的6%琼脂糖凝胶
    孔径(Bead size):45-165µm
    载量(Capacity):>40mg 6×His-tagged protein/ml 基质
    耐压(Tolerance Pressuremax):0.3MPa, 3bar
    储存缓冲液:含20%乙醇的1×PBS
    柱子尺寸(Column Size):0.7×2.5cm(1ml)
    储存条件:4℃保存,有效期2年

    注意事项
    1)建议纯化所用缓冲液和蛋白溶液经0.22µm或0.45µm滤膜过滤后上柱使用。
    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法
    (一)纯化流程

    1 缓冲液的准备
    缓冲液使用原理:低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。Buffer 在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。可溶性组*酸标签蛋白纯化所需配方详见附表1。包涵体组*酸标签蛋白纯化所需缓冲液及配方详见附表2。

    2 样品准备
    2.1 细菌表达的蛋白(本说明以细菌表达蛋白为例)
    1)挑取单菌落到含有适合抗性的LB培养基中,根据载体说明加入相应的诱导剂诱导相应的时间。
    2)表达结束后,将培养液转至离心瓶,7000rpm,离心15min,收集菌体,然后加入1/10体积的裂解液(Lysis buffer)和PMSF(PMSF在破碎前加入,其终浓度为1mM),同时也可加入其他蛋白酶抑制剂,但不能影响目的蛋白与树脂的结合。
    3)之后加入溶菌酶,使其工作浓度为1mg/ml。【注】:如果表达的宿主细胞内含pLysS或pLysE,可以不加入溶菌酶。
    4)将菌体沉淀悬浮起来(如果菌液浓度高,可考虑加入10µg/ml RNase A和5µg/ml DNase I),混匀,置于冰上超声破碎细胞,至菌液基本保持澄清。
    5)收集上述澄清蛋白液,10000rpm,4℃离心20-30min。取上清,0.22µm/0.45µm滤膜过滤后,置于冰上备用或-20℃保存。
    2.2 酵母、昆虫和哺乳细胞分泌表达的可溶性蛋白
    将细胞培养液转移至离心瓶,5000rpm离心10min,收集上清。如上清中不含EDTA、组*酸和还原剂等,即可直接上柱纯化;如含有EDTA、组*酸和还原剂等物质,则需用1×PBS 4℃下透析后方可上柱。
    【注】:对于大量体积的上清,需加入硫*(代"酸")铵进行沉淀浓缩,之后经1×PBS 4℃下透析后上柱。
    2.3 包涵体蛋白纯化(以细菌为例)
    1)将培养液转移至离心瓶,7000rpm,离心15min,收集菌体去上清。
    2)按照菌体:裂解液=1:10(w/v)的比例将菌体充分悬浮,混匀,冰浴超声破碎。
    3)将破碎液转移至离心管,10000rpm,4℃离心20-30min,去上清。可重复步骤2)和3)一次。
    4)按照菌体:裂解液(含8M尿素)=1:10(w/v)的比例将包涵体充分悬浮。
    5)变性条件下纯化His标签蛋白纯化。

    3 样品纯化(以AKTA使用为例)
    1)将泵管道注满去离子水。去掉产品上塞,连接至色谱系统中,再折断下口,将预装柱连接到色谱系统中,注意旋紧。
    2)3-5倍柱体积去离子水冲洗出存储缓冲液。
    3)至少5倍柱体积的Lysis Buffer 平衡色谱柱。推荐流速为5ml/min。
    4)利用泵或注射器上样。【注】:若样品粘度增加,即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压;上样量不要超过柱子的结合能力;大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。
    5)Wash Buffer 平衡柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。【注】:在样品和结合缓冲液中加入低浓度咪唑可以提高样品纯度。
    6)Elution Buffer一步法或梯度法进行洗脱。一步法洗脱中一般5倍柱体积洗脱液即可。梯度洗脱可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多来分离不同结合强度的蛋白质。
    7)建议用更高浓度咪唑(如500mM)彻底清洗纯化柱上结合的杂蛋白。随后依次用3倍柱体积的Lysis Buffer和5倍柱体积的去离子水清洗树脂。5倍柱体积的20%乙醇平衡树脂,最后将树脂保存在20%乙醇的1×PBS中,置于4℃保存。

    4 SDS-PAGE检测
    将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。

    (二)在位清洗
    当填料使用过程中发现反压过高(>0.5Mpa)或者填料上面出现明显的污染时,需对其进行在位清洗(Cleaning-in-Place,CIP)。在位清洗时,先把Ni2+脱掉,清洗结束后,将填料保存在20%乙醇中,后者重新挂Ni后再保存在20%乙醇中。建议按照下面操作去除填料上残留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。
    1 去除强疏水结合的蛋白,脂蛋白和脂类
    使用30%异丙醇清洗5-10个柱体积,接触时间为15-20min可以去除此类污染物。之后再用去离子水清洗10倍柱体积。也可以选择使用含有去污剂的酸性或者碱性溶液清洗填料2倍柱体积。例如含有0.1-0.5%非离子去污剂的0.1M醋酸溶液,接触时间为1-2h。去污剂处理后,需用70%的乙醇清洗5倍柱体积,彻底去除去污剂。最后利用去离子水清洗10倍柱体积。
    2 去除离子作用结合的蛋白
    使用1.5M NaCl 溶液接触10-15min,之后用去离子水清洗10倍柱体积。

    (三)填料再生
    当填料使用过程中发现反压过高(>0.5Mpa),填料上面出现明显的污染,或填料载量明显变低时,需要对其进行镍离子剥离及重新挂镍处理,即填料再生。按照下面操作流程进行:
    1)使用0.2M 醋酸溶液(含6M GuHCl)清洗2倍柱体积;
    2)去离子水清洗5倍柱体积;
    3)2%SDS清洗3倍柱体积;
    4)去离子水清洗5倍柱体积;
    5)乙醇清洗5倍柱体积;
    6)去离子水清洗5倍柱体积;
    7)100mM EDTA(pH 8.0)清洗5倍柱体积;
    8)去离子水清洗5倍柱体积;
    9)100mM NiSO4清洗5倍柱体积;
    10)去离子水清洗10倍柱体积。

    填料再生后,可立即使用,也可保存在20%乙醇中,置于4℃备用。


    强力*化乙锭去除剂优惠关键词:强力*化乙锭去除剂,SY0248,EB Eraser

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