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免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)批发

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  • ¥150 - 2460
  • 百奥莱博
  • 北京
  • SY0319-BQT
  • 2025年07月14日
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      长期

    • 英文名

      Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)

    • 库存

      345

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)批发
    规格:100ml
    英文名:Lysis Buffer for WB/IP Assays (without enzyme inhibitors)
    品牌:百奥莱博
    编号:SY0319
    产地:国产|进口
    本品WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100,不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂,裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

    注意事项

    1)本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂,使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
    2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
    3)如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测,需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线,如无显著影响,则可继续使用。
    4) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
    5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    (一) 细胞样品
    1)融解WB/IP裂解液(无抑制剂),混匀。取适当量的裂解液,根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
    2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
    悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
    3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子检测等操作。
    裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

    (二)组织样品:

    1)把组织剪切成细小的碎片。
    2)融解WB/IP裂解液(无抑制剂),混匀。取适当量的裂解液,根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
    3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
    4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
    5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
    6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。

    我公司的免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)批发,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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    ·STAT5-Luc荧光素酶报告基因质粒
    编号:SY0112
    英文名称:STAT5 luciferase reporter plasmid
    规格:1μg
    STAT5荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(STAT5 luciferase reporter plasimd)是用于检测STAT5转录活性水平为目的的报告基因。Stat5是信号转导和转录活化蛋白(signal transduction and activator of transcription,Stat)家族的重要成员,参与了Jak/Stat信号通路调控。Stat5能够影响细胞的增殖、分化、存活与凋亡,并且在乳腺发育、免疫应答、干细胞自我更新调控、造血作用以及肿瘤的发生发展等中具有重要作用。

    STAT5报告基因主要用于检测Jak/Stat信号通路调控、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

    pGMSTAT5-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个STAT5结合位点,可以高灵敏度地检测STAT5的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得STAT5报告基因更易于转染。

    质粒图谱

    产品细节图片1

    注意事项
    本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
    为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

    使用说明
    pGMSTAT5-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

    储存条件:-20℃。


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    ·冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液
    编号:SY0268
    英文名称:ICE Tissue Stabilizer
    规格:100ml
    本品是一种新型的冰冻组织过渡溶液,可以帮助解冻冰冻组织,同时保护RNA完整性,从而可以使冰冻组织转变到普通的匀浆方法易于处理的状态,以提取高质量的RNA。处理后的冰冻组织不需要在匀浆前将其碾磨成粉,甚至在匀浆前可以进一步对组织进行切割。加入RNAKeeper-ICE溶液后,组织从坚硬的冰冻状态转变为柔软状态,此时该溶液渗入组织,使RNA酶失活。用本品溶液处理后,组织可以在室温下操作而不用担心RNA会发生降解。而且,样品能被安全的称重,进一步切割,或者进行多种实验而不影响RNA的质量。处理后的组织样品可以直接加入到裂解溶液中破碎,也可以置于-20℃长期保存。

    本产品适用于动物组织以及培养细胞、白细胞。经测试,可用于肝、肾、脾、肺、心、胸腺、胰等组织的保存。

    本产品与基于异硫*酸胍的RNA提取试剂如Total RNA Extraction Reagent, Trizol,或基于离心柱的RNA提取试剂盒兼容。

    应用实例

    1. 将本品在-70℃或-80℃预冷。
    2. 样品保存:
    A.动物组织:按100 mg组织比不小于1 ml 本品的比例,将冰冻组织浸没于预冷的本品中。注意:组织块的厚度应不超过0.5 cm,否则会影响本品的渗透效率,导致RNA稳定效果变差。
    B.培养细胞、白细胞:收集细胞,用PBS清洗后加入至少10倍体积本品,盖紧管盖,上下颠倒数次。此时沉淀是否被完全悬浮对实验无影响。
    3. 将浸没于本品的组织转移至-20℃存放。至少16小时后,组织即可匀浆进入后续提取过程;若不立即匀浆,组织可继续在-20℃稳定存放6个月。这个过程中,组织可从溶液中取出,在室温进行切割、称重等操作(注意在室温暴露的时间不要超过30分钟)后继续浸没在本品中保存。
    4. RNA提取:将组织取出,用镊子轻轻挤掉多余的本品溶液,置于裂解液中,立刻匀浆。如果是细胞样品,10000g,4℃离心1分钟,弃上清,加入裂解液。



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