庚肝抗体 (HGV Ab),ELISA,酶联免疫试剂盒
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庚肝抗体 (HGV Ab),ELISA,酶联免疫试剂盒

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  • E00901
  • 国内
  • 2025年09月23日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 灵敏度

    • 供应商

      瓦兰生物

    • 检测范围

      不限

    • 检测方法

      酶联免疫法

    • 应用

      科研单位

    • 适应物种

      不限

    • 标记物

      HGV Ab

    • 样本

      液体

    • 库存

      大量

    • 规格

      96T

    庚肝抗体 (HGV Ab),ELISA,酶联免疫试剂盒

    庚型肝炎病毒(HGV),又称为GB病毒C(GBV-C),是一种与肝炎相关的病毒,属于黄病毒科。尽管HGV的致病性尚未完全明确,但其与肝脏疾病、免疫反应及其他病毒感染的相互作用引起了广泛关注。检测HGV抗体(HGV Ab)对于评估感染状况和监测疾病进展具有重要意义。

    一. ELISA(酶联免疫吸附测定)原理
    ELISA是一种广泛使用的免疫检测技术,用于定量或定性分析样品中抗原或抗体的存在。其基本原理如下:

    1.抗原-抗体特异性结合:
       - 在ELISA实验中,HGV抗原(通常是HGV的某一特定蛋白)被固定在ELISA板的孔中。这些抗原可以是重组蛋白或天然提取的蛋白。

    2. 样品添加:
       - 将待测样品(如血清或血浆)加入孔中,样品中的HGV抗体(HGV Ab)会与固定在板上的HGV抗原结合。

    3. 洗涤步骤:
       - 通过洗涤去除未结合的成分,以减少背景信号,提高实验的特异性和准确性。

    4. 加入酶标记的二抗:
       - 加入与HGV抗体结合的酶标记的二抗(通常是针对人类免疫球蛋白的抗体),该抗体会与结合的HGV抗体形成复合物。

    5. 底物反应:
       - 加入底物溶液,酶会催化底物反应,产生可测量的信号(如颜色变化)。

    6. 信号测定:
       - 使用酶标仪在适当波长下读取反应产生的信号强度,信号强度与样品中HGV抗体的浓度成正比。

    二. 实验步骤概述
    1:涂板:在ELISA板上涂布HGV抗原,固定抗原。
    2:样品添加:加入待测样品,结合HGV抗体。
    3:洗涤:去除未结合的成分。
    4:加入酶标记的二抗::与结合的HGV抗体形成复合物。
    5:底物反应:加入底物,生成可测量的信号。
    6:读取结果:使用酶标仪测定吸光度,计算样品中HGV抗体的浓度。

    三:结果分析
    通过绘制标准曲线(基于已知浓度的标准品),可以计算样品中HGV抗体的浓度。结果通常以浓度(如ng/mL)表示,或以阳性/阴性结果报告。

    四:总结
    HGV Ab ELISA试剂盒利用抗原-抗体特异性结合的原理,通过酶催化反应生成可测量的信号,实现对样品中HGV抗体的定量检测。这一方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。



    试剂盒组成

    名称96孔配置48孔配置备注
    微孔酶标板12孔×8条12孔×4条
    标准品0.3mL 0.3mL
    样本稀释液6mL3mL
    检测抗体-HRP10mL5mL
    20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
    底物A6mL3mL
    底物B6mL3mL
    终止液6mL3mL
    封板膜2张2张
    说明书1份1份
    自封袋1个1个

    注:标准品浓度依次为:2010、5、2.5、1.25、0 ng/mL.
    试剂的准备
    20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
    洗板方法

    1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
    2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    操作步骤

    1. 从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
    4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

    结果判断
    绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

    试剂盒性能

    1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
    2. 灵敏度:最低检测浓度小于0.1 ng/mL
    3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4. 重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
    5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    6. 有效期:6个月

    免责声明

    1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
    2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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