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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
Benzonase Nuclease
- 库存:
880
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BTN101001型Benzonase核酸酶北京厂家现货,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BTN101001型Benzonase核酸酶北京厂家现货
英文名:Benzonase Nuclease
规格:500U
编号:BTN101001
产地:国产|进口
Benzonase是由粘质沙雷氏菌分泌的、由两个大小为26 kD的亚基组成的一种广谱核酸酶,由Benzon公司最先商品化,故名Benzonase。其活力比DNase I 强34倍,能以相同的效率酶切单联和双链DNA和RNA,将其消化成3-5 碱基长度(杂交限度以下)的5´-单磷酸寡核苷酸。其活性需要Mg2+,最佳pH在6-10 之间,最适温度在35-44℃。本产品是在野生型的Benzonase的基础上经过基因工程改进而得。
产品特点:
1.微量本产品就能高效降解所有形式(包括单链,双链,线性和环状)的DNA和RNA,尤其适合从细胞裂解物中去除核酸,降低样品粘度而不影响蛋白电泳图谱。
2.在有变性剂存在的条件下(如4M 尿素)还有活性,可以直接加入很多蛋白裂解液中。
3.降解核酸完全,符合FDA 关于核酸污染的处理规程,可以用于工业生产。
4.可以用于蛋白提取、2D凝胶电泳、Western Blot、免疫沉淀等实验。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
活性定义:在标准反应体系内30分钟内使OD260改变1.0的酶量,相当于彻底降解37μg DNA的酶量。
使用方法:
一、酶的稀释
本产品浓度为1U/μL,如果需要稀释Benzonase,需要自备酶稀释液,稀释液的配方是:50mM Tris-HCl pH8.0,20mM NaCl,2mM MgCl2。
在稀释液中的Benzonase 只能在4℃放置数天。
二、用于去除核酸的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)将500ng鲑鱼精DNA 溶解在50mM Tris-HCl pH8.0,1mM MgCl2,0.1mg/mL BSA中,然后加入90U的Benzonase,37℃保温4小时,只剩下0.2ng可以杂交检测的DNA,如果23℃保温4小时,只剩下0.5 ng可以杂交检测的DNA。如果0℃保温4小时,只剩下1ng可以杂交检测的DNA。
三、用于降低E.coli 裂解液的粘度的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)
将7.5 g E.coli 悬浮于15mL悬浮液(10mM Tris-HCl pH9.0,1mMEDTA,6mM MgCl2)中,加入适量的本产品,然后将悬浮液经过弗氏压碎器破碎后迅速置于0℃冰上。
客户可以根据下表自行选择加入本产品的量
| 本产品在裂解液中的浓度 | 得到不粘稠裂解液所需孵育时间 (不粘稠是以得到可滴落的E.coli裂解液为标准) |
| 0.24U/mL | >60min |
| 2.4U/mL | 15min |
| 8U/mL | 5min |
| 24.0U/mL | 1.25min |
答客问:
Q:什么情况下应该使用Benzonase核酸酶?
A:Benzonase核酸酶的应用领域包括:降低样品粘度以利操作(例如重组蛋白纯化,哺乳动物细胞裂解特下游要求粘度较低等情况):减少存放的外周血单核细胞(PBMC)的结块现象,蛋白复性前高质量包涵体的制备,去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响。
Q:怎样灭活Benzonase核酸酶?如何去除?
A:采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制Benzonase活性,极端条件会造成不可逆失活,例如100mM NaOH,70℃处理30分钟等,Benzonase可以用色谱法从目的产物中分离出去,由于这种核酸内切酶极其稳定,建议在终产物中要求不含有核酸酶的应用中不要使用Benzonase。
Q:我的Benzonase核酸酶遗忘在桌上了,还能用吗?
A:根据破坏性稳定性测试,Benzonase 核酸酶非常稳定,即使在37℃下孵育数月仍能保持>90%的活性。
Q:我需要使用别的缓冲液,哪些条件是Benzonase 核酸酶必需的?哪些条件会降低它的活性?
A:Benzonase核酸酶的活性需要1-2mM Mg2+,而在单价阳离子浓度>50%,磷酸浓度>20mM,硫*(代"酸")铵浓度>25mM等情况下,Benzonase的活性会降低50%
Q:Benzonase核酸酶与蛋白酶抑制剂混合物兼容吗?
A:可以兼容,但是对于含有EDTA 配方的蛋白酶抑制剂混合物要特别小心,EDTA浓度大于1mM时会抑制Benzonase的活性。
Q:我的目的蛋白不溶,需要进行变性条件纯化,Benzonase 核酸酶能在尿素环境消化核酸吗?
A:实际上Benzonase核酸酶在有尿素(浓度可达6M)的情况下会增加活性,在尿素浓度为6M时活性先增加,随着时间处长活性又有降低。
尿素7M时,Benzonase核酸酶15分钟后出现变性并失活。但是在酶失活前多数核酸已经降解了。如果Benzonase 核酸酶的原浓度较高时会部分补偿7M 尿素的影响。
BTN101001型Benzonase核酸酶北京厂家现货极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·核酸浓缩剂
编号:BTN110801
英文名称:Nucleic Acid Concentrate
规格:30mL
稀的核酸溶液一般可以用乙醇沉淀的方法浓缩,此方法的优点是在浓缩核酸的同时还可以去除盐离子等小分子物质,其缺点是操作步骤较长,容易丢失核酸沉淀。本产品是不需要乙醇沉淀的核酸浓缩剂,它通过反复提取,逐渐去除溶液中的水分,使核酸溶液浓缩。
产品特点:
1. 操作简单快捷,只需离心处理。
2. 回收率高,核酸回收率一般都在95%以上,尤其适合回收珍贵的核酸样品。
3.浓缩倍数可以自己决定。
4. 既可用于Oligo,也可用于DNA和RNA分子。
5. 既使用于RNA溶液,也使用于DNA。
6. 既可用于单链核酸,也可用于双链。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 根据核酸的体积加入等体积的本产品,振荡使溶液充分混匀。
2.室温12000 g离心30秒,移弃上清。
3. 剩下的下层溶液即为浓缩后的核酸溶液。
注:一次抽提可以使核酸溶液的体积减少20%(以加入浓缩剂的体积为100%),重复上述浓缩步骤直到核酸溶液达到所需要的体积。
本方法不能除盐,因此核酸溶液中的盐离子,如果有的话,将随核酸的浓缩而浓缩。
BTN101001型Benzonase核酸酶北京厂家现货关键词:Benzonase核酸酶,Benzonase Nuclease,BTN101001
·9°N DNA连接酶
编号:BTN130624
英文名称:9°N DNA Ligase
规格:2500U
9°N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶在45℃-90℃范围内均有活性。
产品用途:
1.可在高温条件下,连接DNA链上的切刻位点;
2.具有极高的耐热性,与PCR反应条件兼容;
3.可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;
4.通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变。
产品组成:
| 组份 | 规格 |
| 9°N DNA连接酶(40000U/mL) | 62.5μL |
| 10×Buffer | 1.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指50μl反应体系中,45℃条件下,15分钟能使50%的1μg BstEII消化的λDNA片段(12bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。粘性末端活性单位相当于切口封闭单位。
注意事项:9°N DNA连接酶不能代替T4 DNA连接酶使用。该酶可以有效连接12bp的互补片段,但却无法连接4bp的互补片段(典型限制酶消化产物)。
BTN101001型Benzonase核酸酶北京厂家现货关键词:Benzonase核酸酶,Benzonase Nuclease,BTN101001
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