丽春红S染膜液销售

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名称：丽春红S染膜液销*(代"售")
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Ponceau S BlotStain
规格：250mL
编号：BTN100924
本产品是基于丽春红S的蛋白印迹膜染液，用于对PVDF膜和NC膜上的蛋白质进行超快染色的试剂。

产品特点：
1．超快，整个过程只需要5分钟。
2．染色可逆，脱色后印迹膜可用于后续试验如免疫检测、ECL、Dot-ELISA。
3．灵敏度为50-150ng。

储存条件：常温运输和避光保存，有效期一年。

使用方法：

1．将印迹转移膜放在一干净的塑料盒中，用去离子水洗涤3次，每次5分钟。
2．用本产品染膜30-60秒。
3．用去离子水脱色数次，每次30-60秒，当背景呈现非常浅的粉色时，停止脱色。转移到印迹膜上的蛋白质在淡红色背景上呈现红色的条带。
4．将印迹膜在空气中稍微放干，然后将印迹膜扫描或照相以永久保存染色的结果。也可用塑料包装膜或塑料袋覆盖在湿的印迹膜上，用铅笔或钢笔勾画出条带，以此直接在印迹膜上标记目的条带的位置。以适当的压力下压，使膜上形成永久性的压痕。
5．丽春红染色的印迹膜可以直接用于Western检测。
6．如果需要去除蛋白质条带中的丽春红S染料，可用自备的0.2mM的NaOH浸泡印迹膜1分钟。
7．用去离子水洗膜3次，每次5分钟，然后空气干燥。

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丽春红S染膜液销*(代"售")关键词：BTN100924,丽春红S染膜液,Ponceau S BlotStain

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·MMLV逆转录酶
编号：BTN60905
英文名称：MMLV Reverse Transcriptase
规格：10000U
该酶是突变型的MMLV逆转录DNA聚合酶，从表达莫洛尼氏鼠白血病病毒reverse transcriptase基因(pol基因)的E.coli细胞中分离纯化而得，由一个分子量为76.1KDa的单亚基组成，可催化以单链DNA、RNA或DNA:RNA杂交链为模板的互补DNA链的聚合反应。跟野生型相比,它没有RNase H活性。

产品特点;
1．延伸性能好，可合成长达12.5 Kb的fμLl-length cDNA。
2．最佳反应温度为42℃，但在50℃时仍然有活性，70℃10分钟能使其失活。
3．能以Cy3-，Cy5-，rhodamine-，aminoallyl-，fluorescein等标记的nucleotides 为底物。
4．可用于first strand cDNA 合成，second strand cDNA 合成，DNA labeling，RNA primer extension等。
5．与PCR 兼容，RT产物可以用于PCR和real-time PCR。
6．能被金属螯合剂，无机磷酸，焦磷酸和多胺抑制。
7．没有RNase H活性。

产品组成：

 

成分	规格
MMLV逆转录酶(200U/μL)	50μl
5×RT Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有限期一年。

使用方法：

一、合成PCR用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA	100-500 ng 10-500 ng 0.01pg-500ng
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 15-20pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。

二、合成建文库用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
poly(A)mRNA 或专一的RNA	1ug 0.5-1ug
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 100pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200 U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二链cDNA的合成或放置在-20℃。

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