蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究

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百奥莱博专业生产销*(代"售")蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究
产地：国产|进口
英文名：Protease Inhibitor Cocktail
规格：1mL
品牌：百奥莱博
编号：BTN80808
组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝*酸蛋白酶(Serine Protease)、半胱*酸蛋白酶(Cysteine protease)、天门冬*酸蛋白酶。
3.与各种细胞裂解液兼容，可以共同使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：临用前室温融解蛋白酶抑制剂复合物(100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解液中。

注意事项：
1.蛋白酶抑制剂复合物在水溶液中极不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2. 避免反复冻融，可分装储存。

蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
ARB13919 猪免疫球蛋白M(IgM)elisa测定使用说明书 Porcine immunoglobulin m,IgM ELISA KIT
BL0236 DEAE葡聚糖凝胶 A-50 DEAE Sephadex A-50
CYB163068 OVA-FITC
BL0849 兔抗人IgG纯化抗体
ARB11840 人凝血因子Ⅸ(FⅨ)酶联免疫定量检测 Human coagulation factor Ⅸ,fⅨ ELISA KIT
藜芦醇 (+)-Catechin hydrate 93-03-8
辛可宁 5"-GDP,2Na 118-10-5
CBZ-L-色*酸 Pentadecanoic acid 7432-21-5
ARB12276 大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)Elisa定量检测 Rat plasmin-antiplasmin complex,pap ELISA KIT
CYB164024 羊抗牛IgG(1：500～1000)-HRP
ARB12437 大鼠骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)尿液中含量检测 Rat osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
ARB13061 小鼠肾损伤分子1(Kim-1)Elisa分析 Mouse kidney injury molecule 1,kim-1 ELISA KIT
ARB10724 人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)Elisa方法检测 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-ra33-antibody,hnrnp/ra33 ELISA KIT
间甲基红 Cholesteryl chloride 20691-84-3
ARB11482 人胰淀素(Amylin)含量测试 Human amylin ELISA KIT
2′-脱氧肌苷 Ruodium (Ⅲ) Chloride Hydrate 890-38-0
*甲脒 L-Tryptophan 618-39-3
BL1151 10×电泳转移缓冲液
BL0765 M-MLV
ARB10249 人乙酰胆碱(ACH)尿液中含量检测 Human acetylcholine,ach ELISA KIT
蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究关键词：Protease Inhibitor Cocktail,蛋白酶抑制剂混合液,BTN80808

PY02-180  赖*酸脱羧酶培养基  5克  
ARB11917 人髓过氧化物酶(MPO)检测服务 Human myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
SJ0204 D(+)Galactosamine hydrochloride D-*基半乳糖盐*(代"酸")盐
F050313 猴IgG抗体 Monkey IgG
联*(代"*")甲酰 AMPS 134-81-6
ARB11599 人铜蓝蛋白(CP/CER)免费代测 Human ceruloplasmin,cp/cer ELISA KIT
PY01-123  蛋黄粉  250克  
BTN101112 柱式水样DNAOUT Column Water DNAOUT
BFD028 呋*(代"喃")它酮快速检测试剂盒
PY01-097  异烟酸  25克  
丙*(代"烯")酰胺  Thionin 79-06-1 
小鼠细胞分离液 Z-D-alanine
BTN120626 UTP溶液,100mM UTP Solution
ARB11189 人降*素原(PCT)含量检测 Human procalcitonin,pct ELISA KIT
低聚木糖 VB1
蛋白酶抑制剂混合液 蛋白质研究关键词：Protease Inhibitor Cocktail,蛋白酶抑制剂混合液,BTN80808


·一站式TA克隆试剂盒
编号：BTN90801A
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(A)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

成分	规格
即用型蓝白T载体(50ng/μL)	20μl
对照插入片段(50ng/μL)	5μl
T4快速连接缓冲液，2×	100μl
T4 DNA连接酶(5U/μL)	30μl
超纯水	1ml
高效感受态细胞	100μL×10只(只B型有)
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。感受态细胞需要干冰运输，-70℃保存，有效期6个月。

自备试剂：插入片段。

使用方法：

一：PCR产物的纯化和定量注意事项
1. 由于PCR体系中有大量会抑制DNA连接反应的dATP、还有一些可能在电泳胶上不一定会显示出来的非特异性扩增产物和引物二聚体，所以PCR产物必须用胶回收方法制备才能用于本试剂盒的连接。可以分别使用本公司柱式DNArc(BTN60202)和PAGE DNArc(包括柱式PAGE DNArc)从琼脂糖胶和PAGE胶上纯化回收PCR片段。具体操作见相关产品使用手册。
2. 琼脂糖胶回收的电泳缓冲液最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
3. 为避免UV对DNA的伤害，切胶最好在日光下进行(使用百奥莱博的绿如蓝染料的话，可以直接在黑色背景下看见DNA条带，不需要紫外光)。如果使用EB或其他染料，必须在紫外下切胶时，最好选择长波(360nm)紫外灯并以最快速度切胶，文献报道短波UV(300nm和240nm)会使DNA连接效率降低400多倍。使用短波UV时，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)减少伤害。
4. PCR片段的体积越小越便于后续操作。洗脱PCR片段时，用最少量的洗脱液洗脱。
 本试剂盒要求PCR回收片段的浓度最好为50ng/μL。如果浓度不够，最好用醇沉淀法沉淀后直接在管内设置连接反应，也可以使用本公司的核酸浓缩剂(BTN110801)直接浓缩。
5. 为准确定量回收的PCR产物同时又节约样品，最好使用微量分光光度计(只需用1μL样品测量)。如果分光光度计需要大量样品，建议使用电泳法定量：将回收的PCR片段与浓度已知的DNA Marker在含EB或绿如蓝染料的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的相对荧光强度而估测PCR产物的浓度。

二：连接反应
1. 短暂离心装有蓝白T载体、连接缓冲液和T4连接酶的离心管。
2.在三个离心管中加入下列成分(注意，对照可以不做，在出现问题时再做)：

成份	样品管	阳性对照管	自连对照管
T4快速连接缓冲液，2×	5μl	5μl	5μl
蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)	Xμl(见注)	不加	不加
对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)	不加	1.5μl	不加
T4 DNA连接酶(5U/μL)	1-1.5μL	1-1.5μL	1-1.5μL
超纯水	补到10μL	补到10μL	补到10μL

注: 如何根据T载体的用量计算PCR纯化片段的最佳用量？
第一：确定插入片段与载体的最佳摩尔比，在本产品的T载体的长度固定(3Kb)时，最佳摩尔比跟插入片段的长度关系如下：

插入片段长度	与载体的摩尔比
1Kb以下	2:1或3:1
跟T载体接近(±1Kb)	1:1
比T载体长1Kb或更多	1:2或1:3

第二：根据选定的最佳摩尔比按下面方程式计算用量：

本产品提供的T载体长度为3 Kb，推荐用量为50ng，如果PCR片段长度为0.5 Kb，最佳摩尔比设定为3:1，则其用量为:

3. 用移液器吹打连接反应液使之混匀，然后放置在16℃孵育30分钟-过夜。
4. 65℃5分钟灭活连接酶后直接用于转化或-20℃保存。

三：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
1. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
2. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。
3.在冰上放置30分钟。
4. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
5. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
6. 将100μL复苏涂布到含Amp的LB琼脂平板上(也可加上X-gal和IPTG)。
7.室温4,000rpm离心剩余的900μl复苏细胞5分钟，弃去800μl上清，用剩余100μL培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
8. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
9. 倒置平皿，于37℃培养，12～16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组总共会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR回收片段的质量。
10. 按常规方法筛选重组子。

MCS位点：

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