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真菌总蛋白质微量提取试剂盒哪里卖

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  • ¥170 - 2390
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN81202-GZU
  • 2025年07月12日
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    • 保存条件

      常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Fungal Total Protein Miniprep Kit

    • 库存

      579

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")真菌总蛋白质微量提取试剂盒哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:真菌总蛋白质微量提取试剂盒哪里卖
    产地:国产|进口
    英文名:Fungal Total Protein Miniprep Kit
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN81202
    本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法,适合于各种形态的各种酵母材料。

    产品特点:
    1.破壁效率高,能达到80-90%。
    2.可以处理各种酵母样品。
    3.操作简单,得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 100ml
    溶液B成分一 50ml
    溶液B成分二 1.5g
    玻璃珠,400μm 5g
    说明书 1份


    储存条件:常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存),有效期一年。

    使用方法:
    准备工作:将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中,充分摇晃使之全部溶解,成为溶液B,然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。

    1.将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中,30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5~2.0。
    2.把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中,混匀。
    3.4℃,5000g离心5分钟沉淀酵母细胞,吸出上清液。
    4.用30μL溶液B悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
    5.100℃下保温3分钟,使蛋白酶失活,样品存放于-20℃。
    6.加入0.1g的玻璃珠。
    7.在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
    8.加入70μl溶液B,稍加振荡,置100℃保温1分钟。
    9.取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。

    关于真菌总蛋白质微量提取试剂盒哪里卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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    ·沉淀型TMB显色试剂盒
    编号:BTN101106
    英文名称:Precipitated TMB Chromogenic Kit
    规格:100mL
    TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。

    产品特点:
    1.相对于DAB来说,灵敏度高。
    2.色泽稳定,无须避光显色。
    3.色带为蓝色,便于观察。
    4.无毒环保,可以放心使用。

    产品组成:
    成分 规格
    溶液A 100ml
    溶液B 100ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、免疫印迹染色
    1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
    4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
    5.空气中晾干。
    6.拍照记录。

    二、免疫化学染色
    1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
    2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
    3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
    4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
    5.小心移去切片上显色工作液。
    6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
    7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
    8.放上盖玻片或封片。
    9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
    10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。

    注意事项:
    1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
    2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
    3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能永久存在。
    4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
    5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。

    疑难解答:
    Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
    A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
    Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
    A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
    Q:如何降低背景读数?
    A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。


    真菌总蛋白质微量提取试剂盒哪里卖关键词:Fungal Total Protein Miniprep Kit,真菌总蛋白质微量提取试剂盒,BTN81202


    ·*酚蓝溶液(电泳级)
    编号:BTN100882
    英文名称:Bromophenol Blue Solution
    规格:10mL
    *酚蓝分子式为C19H10Br4O5S,分子量为669.97,CAS号为115-39-9。易溶于*氧化*溶液,溶于甲醇、乙醇和*酚,是一种pH指示剂,在pH3.0(黄)~4.6(蓝紫)范围,颜色由黄变蓝。本产是*酚蓝的1%水溶液,用作制备常用做电泳指示染料,其泳动率在0.5-1.4%琼脂糖中,相当于300bp dsDNA,在8% PAGE变性胶中相当于20bp dsDNA。如果含*酚蓝的上样液跟样品混合后变黄,则表示样品中酸性物质没去除干净,必须用1M Tris pH8.8调到*酚蓝呈蓝色,否则蛋白将向相反方向移动。

    储存条件:常温运输及避光干燥保存,有效期一年。

    ·一站式DNA尿素-PAGE电泳套装
    编号:BTN90317
    英文名称:One-Stop DNA Urea-PAGE Pack
    规格:30次
    本品是专门用于DNA 尿素-PAGE电泳的一站式试剂盒。

    产品特点:
    1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。用户不需要单独准备各种成分。
    2.可用于DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保护实验等。
    3. 安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
    4.电泳后可直接用于银染、EB染色等实验。

    产品组成:
    成分 规格 保存
    电泳级尿素 210g 常温
    电泳级丙*(代"烯")酰胺 77.34g 常温
    电泳级甲叉双丙*(代"烯")酰胺 2.67g 常温
    10×TBE电泳液 250ml 常温
    电泳级TEMED 1.5ml 4℃,避光
    电泳级过硫*(代"酸")铵 1g 常温
    2×尿素-PAGE上样液 1ml -20℃
    说明书 1份  


    储存条件:常温运输,保存条件见上表,有效期一年。

    使用方法:

    一、PAGE浓度和交联度的选择指南
    尿素-PAGE一般推荐用29:1(丙*(代"烯")酰胺:甲叉双丙*(代"烯")酰胺)的交联度,
    在此条件下,DNA片段和最适PAGE浓度对应关系如下:
    单链DNA长度 最佳PAGE浓度 二甲*青FF迁移率
    对应的长度
    *酚蓝的迁移率
    对应的长度
    50-400nt 8% 160nt 45nt
    200-1000nt 5% 260nt 65nt
    750-2000nt 3.5% 460nt 100nt


    二、制备尿素-PAGE胶
    1. 配制尿素-PAGE胶(这是配制100mL胶的用量,配制更大体积的胶则需以此用量为基础按比例增加)
    A:新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1 克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL超纯水的比例将水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
    B:新鲜交联度为29:1的40%的丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(AB溶液,下同):在装有77.34 g电泳级丙*(代"烯")酰胺干粉的瓶中加入约120mL自备的去离子水,然后将全部甲叉双丙*(代"烯")酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙*(代"烯")酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶解度低,不会溶解在这少量溶液中)。充分摇晃混匀后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
    C:配尿素-PAGE胶:在一个250mL的三角瓶中,先按下表的用量加入去离子水、40%AB溶液和10×TBE缓冲液。丙*(代"烯")酰胺单体溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
    PAGE胶浓度 各成分用量(尿素为克,其余单位是mL) 补水到(mL)
    尿素 40%AB溶液 10×TBE缓冲液
    5% 42 12.5 5.0 100
    6% 42 15.0 5.0 100
    7% 42 17.5 5.0 100
    8% 42 20.0 5.0 100
    9% 42 22.5 5.0 100
    10% 42 25.0 5.0 100
    11% 42 27.5 5.0 100
    12% 42 30.0 5.0 100

    D:搅拌溶解,然后用滤纸过滤。最好能抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应),无条件也可以不脱氧。
    E:加入500μL 10%APS和100μL TEMED,迅速摇匀后倒胶。
    F:在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
    G:室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
    H: 拔出梳子,用0.5×TEB液冲洗加样孔。

    三、样品准备
    2. 对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品:将样品跟上样液1:1 混合,95℃ 3分钟变性,然后放冰上待用。
    3. 对TGGE样品:可以直接上样。

    四:电泳
    4. 将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
    5.预电泳5-30分钟将冰上放置的样品上样。
    6.连接电源线,打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热,这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压,产热都将随电泳时间而变化,不好控制)。对小胶一般用5-6W 固定功率,大胶用15-25W 固定功率。
    7. 终止电泳,取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意:如果银染,必须延长固定时间以便让洗出尿素,否则残留尿素会干扰后面的银染。



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