大肠杆菌T1化学感受态细胞大量库存促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌T1化学感受态细胞大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：大肠杆菌T1化学感受态细胞大量库存促销
产地：国产|进口
编号：BTN140391
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli T1 Chemical Competent Cell
品牌：百奥莱博
 本产品是采用大肠杆菌Mach1-T1 Phage Resistant菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 本感受态细胞是目前生长速度最快的感受态细胞，在*苄青霉素平板上，8-9h可见克隆；用于蓝、白斑筛选，12 h可见蓝斑；将过夜培养的单克隆在2ml的LB培养基中培养4-5h即可进行小量质粒提取。
2.适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，减少克隆DNA同源重组的发生，提高质粒DNA的产量和质量。
3. 本产品具有T1，T5噬菌体抗性。
4. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达109cfu/μg。

菌株基因型：F- φ80(lac Z)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rkmk+)ΔrecA1398 endA1 tonA

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

除大肠杆菌T1化学感受态细胞大量库存促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·酿酒酵母Y2HGold化学感受态细胞
编号：BTN140390
英文名称：E.coli Y2HGold Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
 酿酒酵母Y2HGold是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株，MATa型，可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187 通过mating 操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker 为：trp1，leu2，报告基因为：AbAr，HIS3，ADE2，MEL1。

 Y2HGold-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：pGBKT7和pGADT7。质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N 端1~174 位*基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒pGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C 端768 ~881 位*基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。

 GAL4系统原理：一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域：位于N端1~174位*基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768~881 位*基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的GAL4活性，使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD不与AD结合，将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合，形成bait融合蛋白(bait-BD)和prey融合蛋白(prey-AD)，如果bait和prey发生相互作用，就会促使BD和AD的相互接近，形成完整的GAL4，从而激活报告基因的转录。Y2HGold有四个报告基因：AbAr，HIS3，ADE2，MEL1，分别由三种不同的启动子(G1，G2，M1)启动，这三种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同，其余部分均不同，大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。此外新报告基因AbAr与以前的营养缺陷报告基因相比具有更低背景的优点，也可以降低酵母双杂假阳性发生的概率。

 Y2HGold感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pGADT7质粒检测转化效率>104cfu/μg DNA。

Y2Hgold的基因型是：MATa，trp1-901，leu2-3，112，ura3-52，his3-200，gal4Δ,gal80Δ，LYS2::GAL1UAS-Gal1TATA-His3，GAL2UAS-Gal2TATA-Ade2URA3::MEL1UAS-Mel1TATA AUR1-C MEL1

产品组成：

 

成分	规格
Y2Hgold感受态细胞	0.1ml×10支
PGADT7，10 ng/μL	10μl
Carrier DNA，5μg/μL	100μl
PEG/LiAc	5ml
说明书	1份

储存条件：感受态细胞干冰运输、-80℃保存，Carrier DNA -20℃保存；PEG/LiAc 4℃保存；有效期半年。

自备试剂：目的DNA、YPDA、 SD培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中依次加入2-5μg预冷的目的质粒、10μLCarrier DNA(95-100℃ 5分钟，快速冰浴，重复一次)、500μl PEG/LiAc，吹打混匀，30℃水浴30分钟(15分钟时翻转6-8次混匀)。
3. 42℃水浴15分钟(7.5分钟时翻转6-8次混匀)。
4. 5000rpm离心 40秒，弃上清。取400μl ddH2O 重悬沉淀，5000rpm离心 30秒，弃上清。
5. 取50μl ddH2O 重悬沉淀，涂板，29℃培养48-96小时。

注意事项：
1. 酵母菌株对高温敏感，最适生长温度为27-30℃；高于31℃，生长速度和转化效率呈指数下降。
2.菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine 被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成 Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine 合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P - ribosylamino imidazole(AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
3. 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA 平板29℃，48h培养可见直径1mm 克隆；涂SD 单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 三缺或四缺平板29℃，80-90h培养可见直径1mm 克隆。
4.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
5. 同时转化2-3 种质粒时可增加质粒的用量。


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ARB11671 人维生素D受体(VD R)ELISA代测服务 Human vitamin d receptor,vd r ELISA KIT
ARB10516 人白细胞介素35(IL-35)含量测试 Human interleukin35,IL-35 ELISA KIT
ARB12086 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)elisa检测说明书 Rat aquaporin 2,aqp-2 ELISA KIT
BOC-L-谷*酰胺 Apocynin 13726-85-7
PY04-023  亚碲酸*溶液  0.25mg/支/×10支  每瓶添加于100ml山梨醇麦康凯琼脂基础中，用于肠出血性大肠杆菌0157; H7的分离培养
BL0629 羧基-琼脂糖凝胶4B ECH Sepharose 4B
BTN130857 T4 RNA连接酶 2(截短型 K227Q) T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
ARB11431 人热休克蛋白60(Hsp-60)elisa检测操作说明书 Human heat shock protein 60,hsp-60 ELISA KIT
ARB11532 人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)代做ELISA实验 Human lupus anticoagulant,lac/la ELISA KIT
HC0151 切片盒
N-乙酰-L-亮*酸 5-HT 1188-21-2
F010101 小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg
BTN130424 SP交换介质 SP Medium
PY02-029  碱性蛋白胨水  250克  
ARB11791 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)Elisa定量检测 Human basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
对羟基*乙*(代"胺") Glucose Dehydrogenase 51-67-2
植酸* BCA 14306-25-3
CBZ-D-脯*酸 MMT 6404-31-5
ARB13527 兔C-反应蛋白(CRP)含量检测 Rabbit c-reactive protein,crp ELISA KIT
贝他定 Lanthanum acetate hydrate 58970-76-6
ARB10401 人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)含量测试 Human soluble tumor necrosis factorαreceptor,stnfαr ELISA KIT
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·琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(柱式吸附)
编号：BTN60202
英文名称：Agarose gel DNA column Recovery Kit
规格：50次
本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中(如PCR反应)回收DNA片段。试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA反应体系中回收的DNA片段，回收效率可达50-90%(跟片段大小相关)。

产品特点：
1.高效，回收效率最高可达90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.快速，整个过程只需要十余分钟。
3. 回收DNA的范围为50bp－40Kb(但效率各不相同)。
4. 纯度高，本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 用途广，本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
6. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。

试剂盒组成：

成分	规格
通用溶胶液	25ml
通用洗柱液	50ml
离心吸附柱	50套
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期为一年。

使用方法：
1. 对胶回收：切取含DNA片段的琼脂糖凝胶(100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入一干净的1.5mL塑料离心管(自备)中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg琼脂糖凝胶需要加入300μL-500μL通用溶胶液)。
 PCR回收：直接在PCR反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。如果PCR反应中使用了石蜡，需要预先去除。
2. 50℃保温使胶完全溶化(一般需要5分钟)，其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果片段长度在300bp以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。
3. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上液体收集管，静置3分钟。
 注意：静置有助于DNA与离心吸附柱的硅胶膜结合。若一次加不完，可分两次加入并离心。
4. 12000～15000g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。
5. 加入0.7-0.8mL通用洗柱液于离心柱中，室温静置2分钟。
6. 12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
7. 12000～15000g离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。
8. 将离心柱置于一新的干净的塑料离心管(自备)中，加入30-100μl DNA洗脱液2.0于离心吸附柱硅胶膜的中央，静置3分钟。
9. 12000～15000g离心1分钟。
10.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放-20℃长期保存。

注意事项：
1.电泳回收DNA时，电泳缓冲液可以为TAE、TBE或者DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2。回收效果为SuperBuffer-2最好，TAE次之，TBE最差。详细见SuperBuffer-2产品介绍。
2. 通用洗柱液含有容易挥发物质，使用后一定要拧紧瓶盖，密闭保存。
3. 琼脂糖凝胶体积的大小与回收率成反比关系，即体积越大，越不利于回收，一次胶回收以使用100mg琼脂糖凝胶为宜。
4. 如果在五分钟内凝胶溶化不完全，可以适当的延长水浴时间以使胶充分溶化，否则DNA包裹在琼脂糖凝胶中，影响DNA的回收效率。
5.胶溶化后的液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使DNA与膜充分结合，提高回收效率。
6. 洗脱DNA前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
7. 增大DNA洗脱液2.0使用量有利于回收，但要注意实际上样量与最终回收体积的关系，以便于计算回收率。DNA洗脱液2.0可以用TE或水替代，但回收率稍有降低。

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