北京现货即用型PCR试剂盒(含染料)促销

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货即用型PCR试剂盒(含染料)促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：即用型PCR试剂盒(含染料)
英文名：Instant PCR MasterMix
编号：BTN90805
规格：1ml×10|5mL×20
品牌：百奥莱博
本产品内含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR增强剂、上样染料等所有PCR所需要的成分，用户只需加入模板和引物即可进行PCR反应，具有广泛的用途。

产品特点：
1.扩增效率和灵敏度更高。
2. 方便，用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验。
3.快捷，操作步骤已经最大限度地简化，能减少污染，降低实验误差。
4.产物可直接用于T载体克隆，不需要额外的加A反应。
5.染料单独提供，方便客户组合。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以30μL的标准PCR反应体系为例)
在一干净的PCR管中，加入下列成分：

 

试剂		加入量
PCR MagicMix		15μl
DNA模板(自备)	哺乳动物基因组DNA	0.5-1μg
	酵母基因组DNA	5-500ng
	细菌基因组DNA	0.5-50ng
	质粒DNA	5-500pg
	PCR回收片段	1-100pg
PCR引物(自备)		10pmol each
补水到		30μL

放入PCR仪中进行PCR,结束后取5-10μL直接上样电泳，按照1.0mL PCR MagicMix加入40μL专用染料的比例将40μL专用染料加入到1mL PCR MagicMix中
注意：
1．如果反应体系不是30μL，各成分需要等按比例增加或减少。
2．如果DNA模板中有PCR不明抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物)，可以在PCR体系中加入1/10的PCR抑制物清除剂(BTN60804，30μL体系中加3uL)，可能会对PCR有帮助。

PCR反应的影响因素
变性温度与时间：模板变性温度是决定PCR反应中双链DNA解链的温度，达不到变性温度就不会产生单链DNA模板，PCR也就不会启动。变性温度低则变性不完全，DNA双链会很快复性，因而减少产量。变性温度太高，又会影响酶的活性。一般情况下可设为94℃ 20~30秒，高温时间应尽量缩短，以保持耐热DNA聚合酶的活力，最高变性温度不宜超过95℃。
退火温度与时间：退火温度决定PCR特异性与产量。温度高特异性强，但过高则引物不能与模板牢固结合，DNA扩增效率下降；温度低产量高，但过低可造成引物与模板错配，非特异性产物增加。合适的退火温度一般在45~68℃之间。设置特定反应的最适退火温度，可根据引物的(G+C)%含量进行推测，一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30~60秒，足以使引物与模板之间完全结合，长时间退火没有必要。
延伸温度与时间：PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间，延伸时间根据所用聚合酶扩增速度和扩增片段大小设定，如同样扩增2 Kb片段，若使用Taq酶只需1分钟，使用Pfu酶则应设定2分钟以上。延伸时间过长会导致非特异性扩增带的出现，时间太短则可能得不到扩增产物或得到一些短的非特异性片段。
循环次数：可根据模板DNA的量、扩增片段的大小和扩增产物的下步应用等因素，设定20-40个循环。循环次数太少，扩增量不足，如果循环次数太多，错配几率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数。
酶量：50μl反应体系可用0.5-5 U酶，酶量的选择与模板DNA的量，扩增片段大小等有关，酶量过多易发生非特异性反应，而且可能增加突变的机率，尤其在进行高保真扩增时，应尽量减少酶量，但酶量过少时反应性能下降。
模板：模板可以是单链DNA，也可以是双链DNA，质粒DNA的扩增效率略低于线状DNA。模板加量一般不需太多，不超过1μg为宜，因为加量过多可能导致非特异性扩增增加，但是要考虑模板中靶序列的含量。例如，使用基因组为模板扩增单拷贝或低拷贝靶序列，就需要适当加大模板用量。
引物：引物与模板配对的长度应至少为17个核苷酸，最高不宜超过30个核苷酸，最佳长度为20~24个核苷酸，如需插入酶切位点，应在酶切位点5´端多加几个碱基，有利于酶切。引物的(G+C)%含量组成应均匀，尽量避免含有相同的碱基多聚体。两个引物中(G+C)%含量应尽量相似。引物内部应避免形成明显的次级结构，如发夹结构。两个引物之间不应发生互补，特别是在引物3´端。如果可能，引物3´端最好富有GC，这样退火后有利于引物3´端的延伸。人工合成的引物最好经过色谱层析纯化或PAGE纯化，以除去未能合成至全长的短链等杂质。引物的终浓度一般为0.1-2μm左右，浓度太高会导致非特异性扩增，太低则扩增产物太少。
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北京现货即用型PCR试剂盒(含染料)促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

 

编号	名称
BTN130653	GpC甲基转移酶(M.CviPI)
BTN100908B	一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)
BTN120415	终点显色法内毒素定量试剂盒
BTN130602	Vent DNA聚合酶
BTN131227	10nt随机引物(0.5μg/uL)
BTN100103A	裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
BTN131074	SDS-PAGE样品预处理试剂盒
BTN131212	PCR Mix染料
BTN120685	先锋霉素溶液
BTN160655	Levaditi硝酸*(代"银")法螺旋体染色试剂盒
BTN90313	TBE电泳液，10×
BTN70906	NTP溶液(10mM)
BTN60903	Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH7.5)(不含RNase)
BTN81204	5×SDS-PAGE上样液
BTN130977	生物素化的Oligo(dT)
BTN160101	pUCm-T载体
BTN120615	dATP溶液(100mM)
BTN130641	T4核酸内切酶V
BTN60308	EDTA溶液(RNase-Free)(0.5M,pH8.0)
BTN100874	DNA尿素-PAGE上样液
BTN81029	非变性法蛋白沉淀试剂盒
BTN90504	大肠杆菌XL1-Blue化学感受态细胞
BTN130957	免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
BTN80935	剥离硅烷
BTN130966	水饱和正丁醇
BTN131088	荧光素(FITC)标记亲和素
BTN130599	β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒
BTN130662	Tth RecA蛋白
BTN100838	遗传霉素(G418)干粉
BTN81212C	一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)
BTN100941	通用型全基因组扩增试剂盒
BTN130657	热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
BTN120505	Dam甲基转移酶
BTN120503	藻类RNA柱式提取试剂盒
BTN131104	Western封堵液
BTN70102A	蛋白marker(3.3～20.1kD)
BTN130886	植物线粒体总蛋白提取试剂盒
BTN81208	印迹膜抗体稀释液
BTN131079	重组蛋白A
BTN100103B	裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
BTN121002	绿如蓝核酸染料(可见光型)