Southern DNA Marker Oligo(DIG标

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应Southern DNA Marker Oligo(DIG标记)品牌，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：Southern DNA Marker Oligo(DIG标记)品牌
编号：BTN120654F
英文名：Southern DNA Marker Oligo(Labeled by DIG)
产地：国产|进口
规格：20次
品牌：百奥莱博

我公司的Southern DNA Marker Oligo(DIG标记)品牌，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)
编号：BTN80206
英文名称：Two-Tube RT PCR Kit
规格：50次
本试剂盒是整合cDNA第一链合成试剂和即用型PCR 试剂而得的RT-PCR试剂盒。cDNA第一链合成反应和PCR反应分别在两个离心管中进行。

产品特点：
1. 即开即用，足够50次RT反应(20μL体系)和600次PCR反应(30μL体系)。
2. cDNA第一链合成试剂盒可灵活选用随机引物、Oligo dT引物或基因专一引物，适合各种情况。
3. PCR试剂盒具有即用、简单等优点，PCR mix中含上样染料，所以PCR产物可以直接上样电泳。
4. 两管式操作，RT和PCR在不同试管中进行，便于单独优化RT反应或PCR反应条件。
5.扩增效率高，最长可扩增5Kbp以上的RNA。

试剂盒组成：

 

成分	规格
MMLV 逆转录酶(含RI)	100μl
RT Buffer(含dNTP)	300μl
Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL)	50μl
随机引物(0.2μg/μL)	50μl
RNase-free 水	10ml
PCR MagicMix 3.0	9ml
专用染料	360μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、样品RNA的制备(本试剂盒不提供相关试剂)
1、可用自本公司各种RNA提取方法提取样品的RNA，也可以选用其他供应商的产品，但得到的RNA一定要溶解在RNase-free的超纯水中。

二：RT(逆转录)反应合成cDNA
1. 按下表配制RT反应体系(20μl体系):

RNA模板
总RNA	100-500ng
或poly(A)mRNA	10-500 ng
或专一的RNA(如体外转录制备的)	0.01pg-500ng
引物
Oligo(dT)18(0.5μg/μL)	1μL
或随机引物(0.2μg/μL)	1μL
或自备模板专一反向引物(10pmol/μL)	1-2μL
RNase-free水	补水到12μL

注意：RNA样品不能含有基因组DNA污染。随机引物与RNA 模板的比例将决定cDNA 合成的平均长度(成反比)。一般情况下随机引物效率好于OligodT引物，但如果只想转录总RNA中的mRNA(只占5%左右)，则可优先选用OligodT引物，这样就可以排除非mRNA的干扰。
2. 70℃保温5分钟变性模板后立即冰浴。
3. 按顺序加入6μL RT Buffer(含dNTP)和2μL MMLV 逆转录酶(含RI)，反应终体积为20μl。
4. 42℃保温60分钟。此步为RT反应。
5. 70℃保温10分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。
6. 合成的cDNA可以直接作为PCR 模板使用，不需要纯化。剩余样品可以放置在-20℃长期保存。

三、PCR(30μL体系)
1、将全部专用染料加入到PCR MagicMix 3.0中，轻柔颠倒混匀即可使用。未用完的部分需要在-20℃。也可以不加专用染料，但在PCR结束后，电泳上样前，则需要加入电泳上样液，否则电泳时没法判断电泳速度。
2、在PCR 管中加入下列成分：

成份	加入量
PCR MagicMix 3.0(已加染料)	15μl
cDNA样品(上步的RT反应液)	1-5μl
模板专一性正向引物(10 pmol/μL)	1-2μl
模板专一性反向引物(10 pmol/μL)	1-2μl
补水到	30μl

注意：cDNA 也可以稀释后用作PCR 模板。是否稀释或稀释多少倍完全取决于靶基因的丰度。
3、PCR反应参数(需要根据模板和引物决定，下面的只做参考)：

过程	温度	时间
预变性	94℃	5min
PCR反应(35个循环)	94℃	1min
	55℃	1min
	72℃	2min
最后延伸	72℃	10min

四、电泳检测
取5-0μl PCR产物直接在PAGE或琼脂糖凝胶上电泳，跟分子量标准比较估计出扩增产物的大小。
注：本试剂盒中的PCR mix含有甘油和染料，可以直接上样，不需要额外再加电泳上样液。


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·75%乙醇(RNase-Free)
编号：BTN60401
规格：250mL

·单细胞裂解液(DNA提取)
编号：BTN130803
英文名称：Single Cell Lysis Solution
规格：1mL
本产品为单细胞DNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定。纯化所得DNA可用于全基因组扩增(WGA)等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·小牛胸腺DNA溶液
编号：BTN131207
英文名称：Calf Thymus DNA Solution
规格：1mL
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液，可以用于Southern、Northern预杂交，还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·Southern DNA Marker DL2000(生物素标记)
编号：BTN120654C
英文名称：Southern DNA Marker DL2000(Labeled by Biotin)
规格：20次
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液，可以用于Southern、Northern预杂交，还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)
编号：BTN81210
英文名称：Western Blot Blocking Buffer
规格：250mL
Western Blot实验中，为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附，导致实验结果不清晰，在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可最大限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速高效地封闭膜上多余的结合部位，减少非特异结合情况的产生，降低背景，适用于各种转印膜的封闭。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。


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