柱式毛发DNA提取试剂盒特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式毛发DNA提取试剂盒特价促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式毛发DNA提取试剂盒特价促销
英文名：Hair DNA column extraction kit
规格：50次
编号：BTN80805
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
动物毛发不容易降解，同时含有大量的线粒体，所以是考古研究、法医研究和线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品DNA提取的产品很少，为此我们研发了本产品。

产品特点：
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合，前者使DNA充分释放，后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理论产率一般是0.1-1.5μg之间)。
3.DNA纯度高，OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.适合于动物的各种毛发。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50mL
蛋白酶K溶液(10mg/ml)	1mL
溶液B	15mL
溶液C	50mL
离心吸附柱(15层膜)	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液	5mL
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1.将30-50mg左右毛发充分剪碎(成芝麻大小就可以)，最后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：最好从靠近根部的地方剪取样品。
2.加入1mL溶液A(使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇，β-巯基乙醇的终浓度为5%)和20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。
 注意：最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备*仿，振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12000rpm室温离心3分钟，小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C，上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm室温1分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。
7.将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
8.将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤，一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30μL通用洗脱液。
11.12000rpm离心1分钟，管底即为毛发DNA溶液，可立即用于PCR，也可长期保存在－20℃。
 注意：由于头发中DNA的含量十分少，所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。

想要了解更多关于柱式毛发DNA提取试剂盒特价促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号：BTN140431
英文名称：E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。

菌株基因型：Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


柱式毛发DNA提取试剂盒特价促销关键词：BTN80805,柱式毛发DNA提取试剂盒,Hair DNA column extraction kit

ARB11492 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)elisa检测操作说明书 Human caspase activated deoxyribonuclease,cad ELISA KIT
9001-48-3 谷胱甘肽还原酶(来源于酿酒酵母)Glutathionereductase
ARB11933 大鼠17-酮类固醇(17-KS)elisa检测 Rat 17-ketosteroids,17-ks ELISA KIT
PY04-066  TTC  4mg/支×10支  每支添加于100mlTTC琼脂培养基基础中，用于细菌总数测定
BTN80809 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液1 Phosphotase Inhibitor Cocktail 1
732阳离子交换树脂 Xylitol
BTN130657 无机焦磷酸酶,热稳定 Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
BL0818 HRP标记兔抗马IgG抗体
ARB14262 猪核因子kb(NFkb)酶联免疫定量检测 
73049-39-5 小牛胸腺DNA DNA(calf thymus)
ARB12765 小鼠L选择素(L-SelectIn/CD62L)elisa检测说明书 Mouse l-selectin ELISA KIT
66-84-2 D-Glucosamine  D-*基葡萄糖
PY02-226  我妻氏培养基基础  250克  
1405-87-4 杆菌肽 Bacitracin
苏丹Ⅳ Pyronin B 85-83-6
67-42-5 EGTA  乙二醇－双－(2－*基乙基)四乙酸
*扎*铵 Palmitoleic acid 7281-04-1
ARB14212 鹅肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa定量检测 
ARB10695 人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA检测服务 Human myosin light chain,mlc ELISA KIT
F020103 兔抗辣根过氧化物酶抗体 Rabbit Anti-HRP
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·核酸液相杂交液
编号：BTN131165
英文名称：Nucleic Acid Hybridization Solution
规格：10mL
本产品为4×核酸液相杂交液，可专门用于核酸液相杂交实验，如差减杂交(SSH)等实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·5´RACE试剂盒
编号：BTN101105
英文名称：5´-RACE Kit
规格：10次
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点，目前最通用的方法是5´-RACE法，RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术，它在不建立cDNA文库的前提下，利用已知cDNA序列设计引物，通过往两端延伸和扩增获得其5´-端序列。本试剂盒就是根据5´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图：


产品特点：
1. 即开即用，客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化，包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。

试剂盒组成：

成分	规格
MMLV逆转录酶-RI混合液(RNase H-，200U/μL)	10μl
MMLV Buffer-dNTP混合液	60μl
微量核酸沉淀剂	400μl
TdT(末端转移酶)	10μl
2×TdT Buffer(含dATP)	100μl
PCR MagicMix 3.0	1.5ml
5´-RACE引物A-引物B混合液	100μl
5´-RACE引物C	100μl
RNase-Free水	1ml

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法：

1.变性模板RNA：将1μg mRNA或5μg总RNA加入到一个RNase-free的PCR管中，补RNase-Free水到9μL，65℃保温5分钟后短暂离心，立即放冰上待用。如果RNA浓度偏低，体积超过9μl,可以使用本公司的核酸浓缩剂(需另购,产品编号为BTN110801)浓缩到所需的体积。
2. 设置RT反应(用户可以根据需要设阴性对照)：在上步的含变性后的RNA模板的PCR管中，按顺序加入：

成分	用量
自备的基因专一性引物A(10μM)	4μl
MMLV Buffer-dNTP混合液	6μl
MMLV逆转录酶-RI混合液	1μl
合计	20μl

3. 37℃保温60分钟，42℃保温30分钟，50℃保温10分钟，最后75℃保温10分钟使逆转录酶变性。
4. 短暂离心5秒后待用。
5.在PCR管中加入40μl微量核酸沉淀剂(本产品含不溶的核酸助沉剂，用前需要充分摇匀再取用)，震荡混匀。
6.室温12000rpm离心15分钟，小心吸弃上清。
7. 加入1mL自备75%乙醇，室温12000rpm离心5分钟，小心吸弃上清。
8. 短暂离心数秒，小心吸弃残留液体后，稍微晾干后加入10μL RNase-free水，充分吹打溶解，得到cDNA溶液。注意：为保证加尾效率，溶解cDNA的RNase-free水最好不要超过10μl。
9. 加尾反应：在10μL cDNA溶液中加10μL 2×TdT Buffer(含dATP)和1μL TdT酶，轻柔吹打混匀。
10. 37℃保温15分钟进行加尾反应，然后75℃保温3分钟灭活末端转移酶。
11. 加入0.5mL RNase-free水稀释加尾反应体系。此稀释液将作为PCR的模板。
12. 第一轮PCR：用不同量的稀释后的加尾反应液设置PCR反应(样品组最好设用量梯度，单位：μL)。

成分	梯度1	梯度2	梯度3	梯度4
PCR MagicMix 3.0	25	25	25	25
自备基因专一性引物B(10μM)	2.5	2.5	2.5	2.5
5´RACE引物 A-引物B混合液	2.5	2.5	2.5	2.5
稀释后的加尾反应液	1	5	10	15
RNase-free 水	19	15	10	5
合计	50	50	50	50

13. 按下列条件进行 PCR(注：应根据实际情况选择适当的退火温度)。
 第1次循环：94℃ 5分，48-52℃ 2分，72℃ 4分
 第2-30次循环：94℃ 40秒，52-60℃ 1分，72℃ 3分
 最后延伸：72℃ 15分
14. 取10-20μL PCR产物进行琼脂糖电泳电泳检查PCR结果，如果一条清晰的条带，则可以不做后续的第二轮PCR，而直接进行 DNA 测序或TA克隆。
15. 第二轮PCR：如果第一轮PCR没有一条清晰的条，则带从4管PCR产物中各取1μL分别加入到20μL RNase-free水中进行稀释，然后各取1μL分别作为4管第二轮PCR的模板：

成分	用量
第一轮 PCR产物的稀释液	1μl
PCR MagicMix 3.0	25μl
5´RACE引物 C	2.5μl
自备基因专一性引物 C(10μm)	2.5μl
RNase-free 水	补水至50μl
合计	50μl

16. 按下列条件进行 PCR：第 1-30次循环(94℃ 40秒，52-60℃ 1 分，72℃ 3分)，最后延伸：72℃ 15分
17. 取10-20μL第二轮 PCR产物进行琼脂糖电泳，一般都会有一个样品有清晰的条带出现，则可以直接进行DNA测序或TA克隆。

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