- ¥650 - 1650
- 康朗生物
- 大陆/美国
- KL203901
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输；2-8℃避光保存；勿冰冻。
- 保质期：
低温运输；2-8℃避光保存；勿冰冻。
- 英文名：
StarGlow Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 规格：
ml/盒
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就破坏了。因此，可以采用Annexin V与PI双染的方法，通过流式检测细胞早期凋亡。
【产品货号、规格及组分】
| 货号 | KL203-试用装 | KL203-01 | KL203-05 | KL203-10 |
| 规格 | 10 rxn | 20 rxn | 50 rxn | 100 rxn |
| rh Annexin V- FITC | 50 μl | 100 μl | 250 μl | 500 μl |
| Propidium Iodide (PI)(20 μg/ml) | 100 μl | 200 μl | 500 μl | 1000 μl |
| 4x Annexin V-FITC Binding Buffer | 2 ml | 4 ml | 10 ml | 20 ml |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 | 1份 | 1份 |
注：4x Annexin V-FITC Binding Buffer中各组分的浓度：10mM Hepes/NaOH, pH 7.4, 140mM NaCl, 2.5mM CaCl2
rh Annexin V- FITC保存于50 mM Tris, 100 mM NaCl,1%BSA,pH7.4 溶液中保存
【保存条件】
低温运输；2-8℃避光保存；勿冰冻。
【注意事项】
1. 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2. 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色；处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞，胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇使胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中应尽量不用EDTA，EDTA影响Annexin V与PS的结合。
3. 实验中如需要固定细胞，比如在检测凋亡的同时检测细胞周期，只能选用Annexin V-FITC，不能选用Annexin V-EGFP，因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育，并用Binding Buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加并会产生细胞碎片，可以和Annexin V结合，对结果产生干扰。
4. 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5.试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
6. Annexin V-FITC和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。
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文献和实验产品名称 规格 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I 100tests 产品组成成分： Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E) Annexin V-FITC (51-65874X
protocol - Protocol for Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit (ab14085): 1. Incubation of cells with Annexin V-FITC 1) Induce apoptosis by desired method. 2) Collect 1-5 x 105 cells by centrifugation. 3) Resuspend cells
FACS Procedures for Apoptosis Detection
7-AAD for the PI provided with the kit. Materials: Apoptosis Detection Kit (R&D Systems KNX50) . contains: FITC-conjugated human annexin V, PI, 10x Binding Buffer. 7-Amino-actinomycin (Sigma A-9400)
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