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室温,12个月
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室温,12个月
- 英文名:
详见说明书
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充足
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上海禾午生物科技有限公司
- CAS号:
无
- 规格:
500ml
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文献和实验未反应的戊二醛。加生理盐水至1ml然后加入1ml(含5mg)的抗体溶液和1ml 1Mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液,混合后4℃冰箱放置24h,加入0.1ml 0.2mol/L赖氨酸,置室温2h,以0.15Mol/L pH7.2 PBS液充分透析,离心去沉淀,上清液即为酶结合物,再进一步以硫酸铵沉淀纯化后应用。AKP一般不采用二步法,而只用一步法。 改良HRP二步标记法:取HRP10mg溶于0.4ml,0.25Mol/L pH6.8PBS液中或0.05Mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液
。按厂家说明准备滤柱,用 20 双柱床体积 PBS 注入滤柱,直到缓冲液水平刚刚降低到柱床顶部,关闭滤纸底部的阀门或使用塑料粘土(或 parafilm )封闭底部,使滤柱不再流动。 2.用0.1mol/L 硼酸钠或碳酸钠的制备浓度至少为 2mg/ml 的抗体溶液(pH9.0)。含一级胺的外来分子应避免引入。 3.用无水DMSO 溶解(优级纯) FITC或TRITC至1mg/ml。每次标记反应时需即时配置。 4.每 1ml 蛋白溶液加50ul染液,每次都要5ul 慢慢加入,加入时应轻轻连续搅拌
的残基。二步法操作:将10mg的酶溶于0.2ml含1.25%戊二醛的0.1mol/L pH6.8 PBS中室温放置18h,充分透析或以SephadexG25柱除去未反应的戊二醛。加生理盐水至1ml然后加入1ml(含5mg)的抗体溶液和1ml 1Mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液,混合后4℃ 冰箱放置24h,加入0.1ml 0.2mol/L赖氨酸,置室温2h,以0.15Mol/L pH7.2 PBS液充分透析,离心去沉淀,上清液即为酶结合物,再进一步以硫酸铵沉淀纯化后应用。AKP一般不采用二步
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