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上海禾午生物科技有限公司
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无
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100ml
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文献和实验在制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,以利于切成薄片,这种物质叫做包埋剂。一股用光学显微镜观察的切片,用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂;电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。
反应的范围太小或只观察特定部位的免疫反应,为了准确定位,可做第二次包埋,引第一次包埋时将已进行免疫反应的组织经戊二醛再固定、锇酸后固定、脱水及包埋剂浸透三置于两层耐高温的透明塑料薄膜之间(类似夹心面包),高温聚合后。在解剖显微镜下取出需要的阳性部位作第二次包埋,或将取出的阳性部位用强力快干胶粘在已聚合的包埋剂块上供切片观察。 包埋前染色的组织,以中间部位的结构较理想,表层因受机械修整、挤压的影响,超微结构保存往往不甚理想。为提高工作效率,进行超薄切片制作前,亦应先制作半薄切片观察。为避免超薄
,每次10min; 4.锇酸固定:用1%-2%的锇酸固定2~3小时; 5.清洗:用磷酸 缓冲液 清洗3次,每次10 min; 6.脱水:用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脱水各15min,再用100%乙醇脱水3次,每次30min; 7.置换:用环氧丙烷或丙酮置换3次,每次30min; 8.浸渍:10hr以上,浸渍过程如下: ①丙酮:包埋剂=3:1的浸渍液浸渍(动物样品1hr,植物样品2~3hr); ②丙酮:包埋剂=1:1的浸渍
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