【产品概述】 本产品是专为两步法qRT-PCR实验设计的高灵敏度RT-PCR反应系统和高扩增效率的荧光定量PCR检测试剂盒。该反转录系统可以从极低量的总RNA或poly(A) mRNA合成第一链cDNA,无需额外添加RNase抑制剂,合成的cDNA产量更高,长度可达15 kb。2×RealStar Green Mixture 中的HotStartTaq DNA Polymerase高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq 酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的Taq Polymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性,所含的SYBR Green I荧光染料可以与所有的DNA双链相结合,使该产品可以用于多种不同靶序列的检测。同时,该产品具有高特异性和高灵敏度的特点,即使极低丰度的基因也能得到有效扩增。 【产品组分】
组分名称
KL310-02
KL310-05
StarScript II RT Mix
22 μl
55μl
2×Reaction mix
220 μl
550 μl
Oligo (dT)18 (50 μM)
22 μl
55 μl
Random Primer (50 μM)
22 μl
55 μl
2×RealStar Green Fast Mixture
1.1 ml
1.1 ml × 3
DEPC-ddH2O
1 ml
2.5 ml
*ROX Reference Dye/ROX Reference Dye II
44 μl
132 μl
注:不同仪器所需ROX Reference Dye不同,如需添加,需致电单独配带: ROX Reference Dye (50×):ABI Prism7000/7300/7700/7900HT和ABI Step One /ABI Step One Plus荧光定量PCR仪。 ROX Reference Dye II (50×):ABI Prism7500/7500 Fast荧光定量PCR仪 , MJ Research Chromo4,Opticon (II) , Corbett Rotor Gene 3000 , Agilent Technologies Mx3000P荧光定量PCR仪。 不加ROX Reference Dye: Thermal Cycler Dice Real Time System , LightCycler , Smart Cycler System,Corbett Rotor-gene 6000荧光定量PCR仪等。 【保存条件】 -20℃恒温保存,有效期一年 【注意事项】 1. 使用前请将各组份上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。 2. 尽可能减少2×RealStar Green Mixture在光下的曝露时间,长时间的曝光可导致荧光信号强度的丧失。 3. 本试剂盒不能用于杂交探针法。