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- 江蓝纯
- C116892
- 2025年12月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
两年
- 英文名：
column-layer chromatographic silica gel
- 库存：
99
- 供应商：
江蓝纯
属性
描述
| 别名 | 柱层层析硅胶 ;柱层析硅胶; |
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文献和实验MHC-I 单体的Mono Q柱层析 【试剂及材料】 1、材料 （1）快速蛋白液相色谱装置（FPLC） （2）层析柱（Mono Q HR5/5 Column） （3）离心过滤器（ultrafree-15，ultrafree-4） （4）50ml 聚丙烯离心管 （5）IEC GP8R 离心机 2、试剂 （1）Buffer A ：20mM Tris(PH8.0) （2）Buffer B ：20
uL）至新管，加入 50 ul 7.5 M 的 NH4Ac 和 800 ul 冰乙醇（-20 °C）存放，置于冰上 15 min，使 DNA 充分沉淀，14 000×g 离心 5 min。（7）弃尽上清，置于室温晾干，加入 50～100 ul 无菌水，待 DNA 全部溶解后，加入 1 ul RNase（20 ug/ul），37 °C 孵育 1 小时，于 -20 °C 保存。（8）取 5 ul 的 gDNA 进行 1.5% 琼脂糖凝胶电泳，以鉴定其完整性，并在分光光度计测其浓度，A260/280
一、体外转录 在无菌1.5 ml 微型离心管中，结合以下内容： 4 ul 5倍转录缓冲液 2 ul 0.1 M DTT 4 ul 2.5 MM NTP（A，C，G） 0.8 ul RNA酶抑制剂（25 U/ul）RNA酶抑制剂（Promega）中 100 UM冷UTP 1 ul/ug UL线性DNA模板 5 ul 10 UCI / UL P32 UTP（800Ci/mmol） 1 ul RNA聚合酶SP6，T7或T3 总体积〜20 ul。
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