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99
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诺博莱德
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2×200ml/KIT
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文献和实验24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。 n IL-1a(白细胞介素-1a) IL-1a也可以介导外周血淋巴细胞表面上调表达IL-2R。当IL-1a与IFN-g和激发型CD3单抗合用时,可以明显提高CIK 的细胞毒作用。 【细胞制备】 1. 外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml; 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC)。 1.3 无血清培养液洗涤2次
,不过非特异性会要高一点。 解决方法:摸索一下一抗和二抗的浓度,二抗千万不能加太多。洗涤步骤要严格,加完一抗和二抗后都要洗三遍,在EP管中进行,在96孔板里虽快,但非特异性会比较高;一抗冰浴30分,二抗冰浴20分钟染色。 25、JC-1测淋巴细胞线粒体膜电位问题: 问:我想用JC-1测外周血淋巴细胞线粒体膜电位,国内有文章说: (1)用5ml注射器抽取适量肝素,再抽取患者静脉血2.5ml,PBS溶液稀释一倍,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管管壁缓慢加至液面上层,保持两液面清晰,2000转/分离心20
细胞培养技术 (二)具体实验技术名称: 外周血单个核细胞提取 (三)实验对象: 外周血 (四)简要实验步骤外周血单个核细胞的获取 1在15 Ml离心管中加入2 Ml淋巴细胞分离液。 2取肝素抗凝静脉血与等量PBS充分混匀. 用滴管取混匀后外周血沿管壁缓慢叠加于淋巴细胞分离液液面上. 置离心机离心2 000 rp M×20 Min。
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