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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应QN1067型磷酸化蛋白提取试剂盒供应,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:QN1067型磷酸化蛋白提取试剂盒供应
编号:QN1067
规格:50T|100T
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
磷酸化蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品仅用于科研。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4℃12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
(1)裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
(2)贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;
(3)在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
(4)将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20~30min;
(5)悬浮细胞:4℃400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
(6)裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃12000g离心30min;
(7)将上清移入新的EP管中;
(8)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
注意事项:
(1)实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
(2)PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解。
储存条件:-20℃
关于QN1067型磷酸化蛋白提取试剂盒供应的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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规格:25mg
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CAS:53123-88-9
分子式:C51H79NO13
储存条件:-20℃
纯度:≥98%(HPLC)
QN1067型磷酸化蛋白提取试剂盒供应关键词:磷酸化蛋白提取试剂盒,百奥莱博,QN1067
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购QN1067型磷酸化蛋白提取试剂盒供应。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
, 磷酸化蛋白质的量增加通常伴随着非磷酸化蛋白质的降低。如果在蛋白质提取过程中蛋白质有一部分丢失,磷酸化和非磷酸化蛋白质之间的比例则可能被改变,会导致数据偏差。 以下数据使用两种不同的蛋白质提取方法(SD-001,Invent Biotech, USA 基于柱式法的蛋白质提取试剂盒与 RIPA 缓冲液,未公开的数据)比较 p-stat-3 和 p-56 的磷酸化模式,(G.Szanda, NIH.NIAAA / LPS,USA)。结果表明,对于 stat3 的磷酸化模式,处理(T)和基线水平(NT
-KB p65活性与测总的NF-KB p65活性意义是一样的,我想知道是不是这样? 3、对于NF-KB p65活性测定,用p-p65抗体时,组织蛋白提取能不能用全蛋白提取试剂盒?还是必须用包浆蛋白或者核蛋白提取试剂盒? 4、对于NF-KB p65活性测定时,内参应该选用actin还是GAPDH?如果用GAPDH做内参影响大吗? 期盼您的答复,谢谢!! chuqian1016 NF-KB p65活化入核 会发生磷酸化,所以用磷酸化抗体检测NF
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